[發明專利]一種異養嗜酸菌及利用該菌抑制礦山酸性廢水產生的方法

有效

• 申請號: 201210584735.4
• 申請日: 2012-12-28
• 公開（公告）號: CN103898001A
• 公開（公告）日: 2014-07-02
• 發明（設計）人: 劉興宇;陳勃偉;溫建康;張躍紅
• 申請（專利權）人: 北京有色金屬研究總院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C22B3/18;C12R1/01
• 代理公司: 北京北新智誠知識產權代理有限公司 11100
• 代理人: 王淳

技術領域

本發明涉及微生物技術領域。特別是涉及一種Alicyclobacillus屬細菌、其培養方法以及利用該菌抑制礦山酸性廢水產生的方法。

背景技術

在中性甚至堿性環境中，只要黃鐵礦暴露在空氣中或含溶解氧的地下水與礦石接觸，礦石就會緩慢氧化產生二價鐵離子。此時，由于pH較高，二價鐵離子可迅速氧化成為三價鐵離子，而三價鐵離子的存在，會加速黃鐵礦的氧化過程，并使pH迅速下降，當pH進一步下降至3.5以下，在微生物的催化作用下，會進一步源源不斷地產生三價鐵離子，并使得黃鐵礦等硫化礦的氧化速率進一步提高。因此，三價鐵離子是氧化硫化礦產生礦山酸性廢水的關鍵因素，抑制三價鐵離子的產生，可以降低環境電位并減少礦山酸性廢水的產生。

發明內容

本發明的第一個目的是提供一株高效的異養嗜酸細菌菌種，該菌種可顯著降低黃鐵礦的溶解率。

本發明的第二個目的是提供一種可以富集、分離、培養該細菌的培養基。

本發明的第三個目的是提供一種利用該菌及碳源減少硫化礦溶解的方法。

本發明的目的是通過如下技術方案實現的：

一種異養嗜酸菌，其特征在于，菌種名稱為脂環酸桿菌Alicyclobacillus?sp.，保藏單位為：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，保藏日為：2012年12月26日，保藏登記號為：CGMCC?No.7038。

如上所述的異養嗜酸菌是純菌株，利用16S?rDNA克隆文庫技術鑒定該菌株表明，該菌株屬于Alicyclobacillus屬。

如上所述的異養嗜酸菌可利用碳源還原三價鐵為二價鐵，降低溶液電位并減少硫化礦溶解。

用于富集、分離培養如上所述異養嗜酸菌的培養基，其特征在于，取0.25g酵母粉、0.5g蛋白胨、0.25g?NaCl和1000mL蒸餾水，混勻后添加結冷膠30g/L，調pH至3.0。

如上所述異養嗜酸菌的富集、分離培養方法，其特征在于，將所述異養嗜酸菌菌種接種入如上所述的培養基中，在40-50℃的培養溫度下，搖床培養。

一種利用如上所述異養嗜酸菌抑制礦山酸性廢水產生的方法，其特征在于，將所述異養嗜酸菌的菌種，采用如上所述的方法進行富集培養后，接種至廢棄硫化礦山。

如上所述的方法，優選地，所述菌種接種至廢棄硫化礦山的接種量為每m³面積2~4L。

如上所述的方法，更優選地，所述菌種接種至廢棄硫化礦山的接種量為每m³面積約3L。

如上所述的方法，優選地，在接種所述菌種后，若所述廢棄硫化礦山的環境pH降低0.5，則繼續補加培養基，補加量為每m³面積2~4L。

如上所述的方法，更優選地，補加培養基的補加量為每m³面積約3L。

如上所述異養嗜酸菌的獲得方法為：

（1）按照如上所述的菌種富集分離培養基配方配制培養基，調pH為3.0，121℃下滅菌25分鐘，之后每100mL培養基倒一塊平板。

（2）將100mL含所述異養嗜酸菌的水樣加入0.3g酵母粉，在45℃下輕輕震蕩富集培養1周。通過測量細菌培養液在600nm處的吸光值判斷細菌生長情況，當測得的OD600的數值在0.6-0.8之間時，即可進行下一步操作。

（3）將富集的異養嗜酸菌涂布于上述培養基平板，并挑單菌落進行進一步平板劃線。分離出的單菌落采用下面（4）（5）所述方法進行進一步鑒定。

（4）純化后的細菌利用掃描電鏡進行菌種形態觀察。

（5）采用16S?rDNA克隆文庫技術對分離純菌株進行鑒定，鑒定結果表明該菌株屬于Alicyclobacillus屬。

本發明的有益效果在于：

本發明提供了一株菌株Alicyclobacillus?sp.，該菌可在酸性環境下生長，利用該菌及外加碳源，可還原環境體系中的三價鐵離子并降低環境電位，減少體系硫化礦溶出，從而得以抑制礦山酸性廢水產生。

附圖說明

圖1為本發明菌種的掃描電鏡照片。

具體實施方式

以下通過實施例對本發明作進一步說明。