[發明專利]一種醋酸液態發酵快速啟動的方法無效
| 申請號: | 201210582542.5 | 申請日: | 2012-12-28 |
| 公開(公告)號: | CN102994579A | 公開(公告)日: | 2013-03-27 |
| 發明(設計)人: | 夏小樂;朱小明;辛瑜;楊海麟;朱美玲;王武 | 申請(專利權)人: | 江南大學 |
| 主分類號: | C12P7/54 | 分類號: | C12P7/54;C12R1/02 |
| 代理公司: | 無錫市大為專利商標事務所 32104 | 代理人: | 時旭丹;劉品超 |
| 地址: | 214122 江蘇省無錫市*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 醋酸 液態 發酵 快速 啟動 方法 | ||
1.一種醋酸液態發酵快速啟動的方法,其特征在于步驟如下:
(1)將乙醇和對數中后期的新鮮種子液混合,接種量為1:5-1:20,初始醋酸濃度為10-20?g/L,初始乙醇濃度為40-60?g/L,控制該步驟混合后的體積為終體積的30%,于30℃、通氣量為0.25vvm發酵;
所述對數中后期的新鮮種子液為在種子罐中發酵到對數中后期的醋酸發酵液;該醋酸發酵液OD600達到1.1-1.3,無菌體沉降,鏡檢無菌體自溶現象;
(2)?發酵至醋酸含量達到30g/L時,加入醋酸菌發酵營養鹽1‰-5‰(w/v),再加入15%終體積量的乙醇,使得本步驟發酵體積達到終體積的45%,于30℃通氣量0.25vvm發酵;
所述醋酸菌發酵營養鹽為本實驗室已公開發明專利201010510084.5經過改良的醋酸菌發酵營養鹽:包括以重量百分計26%-27%水解酵母粉,15%-16%檸檬酸銨,44%-45%葡萄糖,4%-5%磷酸氫二鉀,3%-4%磷酸氫二鈉,5%-6%硫酸鎂;在此基礎上加入1%-5%異戊醇、對羥基苯甲酸、莽草酸、3,3-二甲基丙烯酸、3-甲基-2-丁烯-1-醇中的一種;
所述的醋酸菌發酵營養鹽,發酵前12小時溶解于水中,制成15%-30%(w/v)濃度的營養鹽溶液,發酵前加入1%(v/v)液態發酵醋,5%(v/v)食用酒精配制成營養鹽溶液加入;
(3)?發酵至醋酸含量達到40?g/L?時,加入22%終體積量的乙醇,此時醋酸濃度下降到27g/L,于30℃通氣量0.25vvm發酵;
(4)?發酵至醋酸含量再次達到40?g/L時,加入最后33%終體積量的乙醇,補加醋酸菌發酵營養鹽1‰-2.5‰(w/v),于30℃通氣量0.25vvm發酵;
步驟(3)、(4)中所述的加入乙醇的方法是流加,添加時間不超過10min,如發酵體積過大,采用2-3個進樣口同時流加;
啟動時間為:從初始到OD600達到0.8-1.0,啟動時間應小于18h。
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