[發明專利]一株具有立體選擇性脂肪酶活性的酵母菌及其生物拆分制備S-型利斯的明的方法

有效

• 申請號: 201210581957.0
• 申請日: 2012-12-28
• 公開（公告）號: CN103122319A
• 公開（公告）日: 2013-05-29
• 發明（設計）人: 劉宏民;李永紅;單麗紅;秦上尚;鄭甲信;趙俊杰;田丹
• 申請（專利權）人: 鄭州大學
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12P13/02;C12R1/645
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 時立新

技術領域

本發明涉及一株具有立體選擇性脂肪酶活性的酵母菌，及利用其進行生物拆分制備S-型利斯的明的方法，屬生物化工領域。?

背景技術

阿爾茨海默癥(AD)是1907年德國神經病理學家阿爾茨海默首次發現并報道的，是一種進行性神經退化疾病，其特征是記憶和認知功能漸進的損傷。已成為年齡在65歲以上的人第四大死亡原因。輕中度的阿爾茨海默癥(AD)表現為輕度語言、記憶功能障礙，但并未完全喪失自理能力；重度阿爾茨海默癥(AD)則基本喪失語言表達、認知和記憶能力，甚至出現大小便不能自理的現象，已失去自理能力。1993年我國制訂的診斷阿爾茨海默癥(AD)標準1.?通過智力檢測證實為癡呆；2.?有2項及更多項的識別功能障礙；3.?記憶和識別障礙進行性逐漸加重；4.?無意識障礙；3.?40歲至90歲時發病；4.?沒有其他軀體或腦部疾病。?

目前，阿爾茨海默癥已經成為主要的公共健康問題。據統計，年齡大于80歲的人口中有20%受到阿爾茨海默癥的侵害。而阿爾茨海默癥患病的百分比隨著年齡的增長而變大：65~75歲患病者為該年齡段人口的1%，而80歲患病者高于該年齡段人口的8%。據報道，阿爾茨海默癥是僅次于癌癥和心臟疾病之后的第三種威脅人類健康的疾病^[。此外，年齡超過65歲的癡呆癥患者中約有50~60%是阿爾茨海默癥患者，女性發病率較男性略高。阿爾茨海默癥對人類健康的危害和醫療費用的增加都使得尋找一種有效的治療方案顯得尤為重要。?

利斯的明（Rivastigmine），又稱卡巴拉汀，?化學名(S)-N-乙基-[3-（1-二甲基氨基）乙基]-N-甲基-氨基甲酸苯酯，結構式如式1，是氨基甲酸酯類腦選擇性乙酰膽堿酯酶抑制劑，選擇性地作用于大腦區域內并有較長持續時間的活性。?

它的酒石酸鹽的商標名稱為氨基甲酸銨?Exelon。1997年在瑞士上市，2000年經FDA批準在美國上市，其后在世界160多個國家上市，我國SFDA(國家食品監督管理局)也于2000年批準Exelon膠囊在國內上市。利斯的明對輕中度阿爾茨海默癥（AD）有溫和節制作用，對帕金森癥^]和路易小體引起的癡呆癥以及血管性癡呆^[也具有良好的治療效果。臨床證明其安全性和耐受性較好，沒有肝臟毒性，是唯一不經過P450酶代謝的藥物，其療效較其他膽堿酯酶抑制劑更好。?

式1?S-型利斯的明的結構式?

迄今為止，得到單一構型S-型利斯的明途徑有：手性酸拆分外消旋體（參考文獻：(S)-N-乙基-N-甲基-3-[1-(二、甲胺基)-乙基]-氨基甲酸苯酯及其酒石酸鹽的制備方法，WO2007025481,?2007-03-08）；過渡金屬催化（參考文獻：M.?Hu,?F.-L.?Zhang?and?M.-H.?Xie,?Novel?Convenient?Synthesis?of?Rivastigmine[J].?Synth.?Commun.,?2009,?39:?1527~1533；?Alessandro?A.?Boezio,?Julien?Pytkowicz,?Alexandre?Co?te′?,?and?Andre′?B.?Charette?Asymmetric,?Catalytic?Synthesis?of?γ-Chiral?Amines?Using?a?Novel?Bis(phosphine)?Monoxide?Chiral?Ligand[J].?J.?AM.?CHEM.?SOC.?2003,?125:14260~14261.）；脂肪酶催化拆分羥基中間體（參考文獻：Juan?Mangas-Sanchez,?Mar′a?Rodr′guez-Mata,?Eduardo?Busto.Chemoenzymatic?Synthesis?of?Rivastigmine?Based?on?Lipase-Catalyzed?Processes[J].?J.?Org.?Chem.?2009,?74:5304~5310.）。這些方法都具有一定的缺陷，復雜的合成步驟、金屬中的雜質以及多步手性鹽的重結晶過程等。