[發明專利]一種分離富集山豆根中具異戊烯基黃酮部位的方法

有效

• 申請號: 201210580237.2
• 申請日: 2012-12-27
• 公開（公告）號: CN103083392A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: 顏繼忠;李行諾;陳垚
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: A61K36/489
• 分類號: A61K36/489;A61K125/00
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;俞慧

（一）技術領域

本發明涉及一種中藥有效成分分離技術領域，特指一種利用大孔吸附樹脂法富集純化山豆根中具異戊烯基黃酮部位的方法。

（二）背景技術

山豆根為豆科（Leguminosae）槐屬植物越南槐Sophora?tonkinensis?Gagnep.的干燥根及根莖，主產于廣西、貴州、云南、廣東、江西等地，其味苦、性寒，為清熱解毒、消腫利咽之要藥，主治火毒蘊結、咽喉腫痛、齒齦腫痛等癥。現代藥理研究表明山豆根具有抗病毒、抗肝損傷、抗腫瘤等作用，其含有的黃酮和生物堿兩大類成分主要為這些藥理活性的物質基礎。

經檢索，現有專利中，CN1994364A的發明專利是通過調節溶液pH，使用二次大孔吸附樹脂柱色譜法，收集40%-60%乙醇洗脫液作為山豆根提取物；CN101347497A的發明專利是通過有機溶劑提取，硅膠柱層析結合制備液相色譜分離得到山豆根中的一些有效成分；CN101278969A的發明專利是使用聚苯乙烯型陽離子交換樹脂對山豆根水提物中非生物堿部位進行制備。而采用大孔吸附樹脂分離富集山豆根的95%乙醇提取物，制備山豆根中具異戊烯基黃酮部位的研究尚未見報道。

（三）發明內容

本發明的目的是提供一種一步柱層析即可得到山豆根中具異戊烯基黃酮部位的分離富集方法，具有簡單、快速、成本較低的特點。

為實現上述發明目的，本發明采用如下技術方案：

一種分離富集山豆根中具異戊烯基黃酮部位的方法，包括如下步驟：使山豆根的乙醇提取液通過大孔吸附樹脂進行柱色譜分離，所述大孔吸附樹脂為大孔吸附樹脂D101或大孔吸附樹脂AB-8，依次用40%-50%乙醇、80%-95%乙醇洗脫，收集80%-95%乙醇洗脫液，濃縮至浸膏狀，干燥得到山豆根中具異戊烯基黃酮部位。

本發明所述的山豆根的乙醇提取液是以山豆根藥材為原料，以乙醇為提取試劑，通過常規提取方法獲得，其中控制山豆根的乙醇提取液中的乙醇濃度為20%-40%。本發明具體推薦所述的山豆根的乙醇提取液通過如下方法獲得：將山豆根藥材粉碎，加入8~20倍的70%-95%乙醇（優選為95%乙醇），回流提取，提取液過濾，取濾液濃縮至乙醇濃度為20%-40%，即得山豆根的乙醇提取液。作為優選，將山豆根藥材粉碎至40~200目。作為優選，回流提取2~3次，每次60~90分鐘，以充分提取山豆根中的有效成分。

作為優選，柱色譜分離過程中，用40%-50%乙醇或80%-95%乙醇洗脫時，每個濃度沖洗8~10個保留體積。

作為優選，柱色譜分離過程中，先用50%乙醇洗脫，再用90%乙醇洗脫。

本發明具體推薦所述的分離富集山豆根中具異戊烯基黃酮部位的方法按照如下步驟進行：

（1）將山豆根藥材粉碎，加入8~20倍的70%-95%乙醇，回流提取，過濾，取濾液濃縮至乙醇濃度為20%-40%，得到山豆根的乙醇提取液；

（2）將山豆根的乙醇提取液通過大孔吸附樹脂，依序用40%-50%乙醇、80%-95%乙醇洗脫，每個濃度沖洗8~10個保留體積，收集80%-95%乙醇洗脫液；

（3）將步驟（2）獲得的80%-95%乙醇洗脫液減壓濃縮至浸膏狀，經真空干燥或冷凍干燥成干粉，即得山豆根中具異戊烯基黃酮部位。

本發明進一步推薦所述的分離富集山豆根中具異戊烯基黃酮部位的方法按照如下步驟進行：

（1）將山豆根藥材粉碎，加入8~20倍的95%乙醇，回流提取2~3次，每次60~90分鐘，過濾，取濾液濃縮至乙醇濃度為20%-40%，得到山豆根的乙醇提取液；

（2）將山豆根的乙醇提取液通過大孔吸附樹脂，依序用50%乙醇、90%乙醇洗脫，每個濃度沖洗8~10個保留體積，收集90%乙醇洗脫液；

（3）將步驟（2）獲得的90%乙醇洗脫液減壓濃縮至浸膏狀，經真空干燥或冷凍干燥成干粉，即得山豆根中具異戊烯基黃酮部位。

本發明中的乙醇濃度均為體積濃度。

與現有技術相比，本發明的有益效果主要體現在：?

（1）本發明所述的方法采用高濃度乙醇提取，大孔吸附樹脂分離富集的工藝簡單，高效，過程簡便，目標明確，適合工業生產；

（2）本發明整個工藝過程中，除使用乙醇外，未帶入其他外源物質，并且在減壓濃縮過程中可除去；未使用其它任何毒性有機溶劑，安全、環保；

（3）本發明所用樹脂均可再生并重復使用，有利于降低工藝的成本。

（四）附圖說明