[發明專利]H3型組蛋白及其抗體在煙草青枯病抗性檢測中的應用

有效

• 申請號: 201210580018.4
• 申請日: 2012-12-27
• 公開（公告）號: CN103018466A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 宋浩;丁偉;陳薇;周燕
• 申請（專利權）人: 上海中科新生命生物科技有限公司;湖南中煙工業有限責任公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 王潔

技術領域

本發明涉及生物技術檢測技術領域，特別涉及煙草青枯病抗性檢測技術領域，具體是指一種H3型組蛋白及其抗體在煙草青枯病抗性檢測中的應用。

背景技術

煙草青枯病是熱帶、亞熱帶地區煙草的主要病害之一，目前在中國長江流域及其以南煙區普遍發生，其中以廣東、福建、臺灣、湖南、江西、廣西東部、安徽南部、四川及貴州局部煙區為害嚴重，個別年份常常暴發流行，造成毀滅性損失。近幾年來，該病的發病和為害范圍有向北方煙區擴展的趨勢，在山東、河南、陜西及遼寧等省都有發生，局部地區為害較重。目前該病造成的損失已居各類病害的第4位，因此，尋找有效的防治青枯病的方法和培育具有青枯病抗性的煙草品種是當前植物病理學和育種學研究的重要方向之一。

到目前為止，防治煙草青枯病最好的方法是利用抗病雜交品種。據統計至2011年底，在世界范圍內種植的煙草品種已達2000份以上，其中主栽品種超過400份。所以，如何對這些煙草品種的青枯病抗病性進行合理的篩選并評價這些寶貴的種質資源、最后應用這些資源以培育出對青枯病高抗的煙草品種具有十分重要的意義。

因此，為篩選和培育的目的而進行研究和開發在煙草青枯病抗性品種中高表達的基因和/或蛋白質具有重要意義。本領域迫切需要新的在煙草青枯病抗性品種中高表達的基因和/或蛋白質。

蛋白質煙草H3型組蛋白（Histone?H3）的NCBI登錄號為gi|3273350|，Uniport登錄號為A7VMF1。H3型組蛋白是組成真核細胞染色體核小體主要成分之一，一個核小體由兩個H2A，兩個H2B，兩個H3，兩個H4組成的八聚體和147bp纏繞在外面的DNA組成。研究表明，這些組成成分的核心部分狀態大致是均一的，游離在外的N-端則可以受到各種各樣的修飾，包括組蛋白末端的乙酰化，甲基化，磷酸化，泛素化等等。所以組蛋白的修飾與基因表達調控有關。

目前研究發現組蛋白是不可缺少的動態轉錄調控成分，會發生許多組蛋白翻譯后的共價化學修飾，包括乙酞化、甲基化、磷酸化、泛素化、SUMO化及ADP-核糖基化等，這些修飾通常發生于組蛋白的氨基端尾部，它們通過改變組蛋白-DNA和組蛋白-組蛋白的相互作用而引起染色質的結構和功能變化，影響基因表達并且這種影響取決于氨基末端被修飾的位點。在四種核心的組蛋白中，H3似乎擁有較多的修飾位點，這些調控涉及到基因調控和染色質組裝等過程。組蛋白H3系列蛋白已經被報導存在于很多植物中，然而它們的表達模式和在很多研究常用植物中的拷貝數現在還不是很清楚。

有文獻報道，H3型組蛋白可能與水脅迫有關，水能夠調節水稻H3，小麥H3與一個與鹽脅迫相關的蛋白WAF1相互作用。水稻根部的RH13.2基因在鹽脅迫下表達量增加。

到目前為止，還沒有蛋白質煙草H3型組蛋白與煙草青枯病有關的報道。

發明內容

為了解決上述存在的問題，本發明的目的是提供一種H3型組蛋白及其抗體在煙草青枯病抗性檢測中的應用，該H3型組蛋白及其抗體在煙草青枯病抗性檢測中的應用可以簡單、方便、快速、可靠、靈敏地檢測煙草青枯病抗性，為篩選煙草青枯病抗性品種以及輔助傳統的抗病雜交育種提供一條全新的途徑，適于大規模推廣應用。

為了實現上述目的，在本發明的第一方面，提供了一種H3型組蛋白在煙草青枯病抗性檢測中的應用。

較佳地，所述H3型組蛋白作為煙草青枯病抗性蛋白標志物。

較佳地，所述H3型組蛋白的氨基酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。

在本發明的第二方面，提供了一種抗H3型組蛋白抗體在煙草青枯病抗性檢測中的應用。

本發明的有益效果在于：

1、本發明可以通過H3型組蛋白在煙草青枯病抗性檢測中的應用，從而可以簡單、方便、快速、可靠、靈敏地檢測煙草青枯病抗性，為篩選煙草青枯病抗性品種以及輔助傳統的抗病雜交育種提供一條全新的途徑，適于大規模推廣應用。

2、本發明還可以通過抗H3型組蛋白抗體在煙草青枯病抗性檢測中的應用，從而可以簡單、方便、快速、可靠、靈敏地檢測煙草青枯病抗性，為篩選煙草青枯病抗性品種以及輔助傳統的抗病雜交育種提供一條全新的途徑，適于大規模推廣應用。

附圖說明

圖1是H3型組蛋白的免疫印跡分析結果圖。其中A為采用肌動蛋白Actin抗體對內源Actin進行免疫印跡的結果圖，B為采用鼠源H3型組蛋白單克隆抗體對H3型組蛋白進行免疫印跡的結果圖，1，2，3均為抗病品種DB101的蛋白質樣品，4，5，6均為感病品種紅花大金元的蛋白質樣品。