[發明專利]基于3D紙芯片電致化學發光DNA傳感器的制備并用于同時檢測Hg2+、Ag+

無效

• 申請號: 201210577865.5
• 申請日: 2012-12-27
• 公開（公告）號: CN103091302A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: 于京華;張萌;葛磊;葛慎光;顏梅;黃家棟;李偉平;楚成超
• 申請（專利權）人: 濟南大學
• 主分類號: G01N21/66
• 分類號: G01N21/66
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種基于3D紙芯片電致化學發光DNA傳感器的制備并用于同時檢測Hg²⁺、Ag⁺，其特征是包括以下步驟：

1.1?選擇能用于修飾電極表面的多孔金納米線，修飾到紙電極表面，制備金膜自組裝傳感器；

1.2?選擇能夠分別與Hg²⁺、Ag⁺進行特異性結合的DNA片段，利用自組裝技術修飾到(1)處理過的電極表面；

1.3?選擇不同的樣品進行處理，利用自組裝技術與1.2中的DNA片段分別進行特異性結合；

1.4?利用現有方法，制備能夠在負電勢下產生光信號的量子點；

1.5?利用現有方法，制備能夠在正電勢下產生光信號的功能納米分子；

1.6?制備能夠增強電子傳遞，起信號放大作用的多孔納米材料；

1.7?利用層層自組裝表面修飾技術等，將1.6分別與1.4和1.5制備的材料復合，制作具有信號放大作用的ECL探針；

根據權利要求1所述的制備基于3D紙芯片ECL?DNA傳感器的方法，及在同一工作電極上對樣品中的Hg²⁺、Ag⁺進行同時檢測，其特征在于該方法的具體步驟為：

2.1?在計算機上設計微流控紙芯片的疏水區的打印圖案，將濾紙裁剪成打印機所需尺寸(例如A4等)放到噴蠟打印機中，將疏水區打印到濾紙上；

2.2?將2.1中打印的濾紙進行絲網印刷，將工作電極、參比電極、對電極印刷到與疏水區匹配的區域；

2.3?將2.2中制備好的濾紙放置到加熱器或者烘箱中，在70-140℃攝氏度下加熱1-3?min；

2.4?將制備的整張濾紙按照蠟打印的圖案進行裁剪，得到單個微流控3D紙芯片ECL傳感器；

2.5?將制備的多孔金納米線修飾到工作電極表面；

2.6?將制備的PdAg合金納米材料溶液冰水浴超聲處理10?-?30?min，得到分散的合金材料溶液；

2.7?將制備的碳點溶液離心處理5?-?10?min，除去不發光的沉淀，得到分散的碳點溶液；

2.8?將制備的P酸溶液超聲處理10?-?30?min，得到分散的碳點材料溶液；

2.9?將步驟2.6制備的PdAg合金分別與步驟2.7、步驟2.8中制備的碳點、P酸溶液混合，超聲處理15-30?min，之后離心處理5?-?10?min，除去沉淀，得到分散的PdAgCQDs,?PdAgP-acid溶液；

2.10?將步驟2.9制備的PdAgCQDs,?PdAgP-acid溶液與分別能與Hg²⁺、Ag⁺進行特異性結合的DNA片段混合，磁力攪拌1-2?h,?之后進行離心處理10?-?15?min，得到相應的單分散溶液；

2.11?將步驟2.10制備的溶液修飾到電極表面，用二次水沖洗掉沒結合上的DNA，在室溫下干燥3?-?5?min；

2.12?將一定濃度的含有Hg²⁺、Ag⁺樣品滴加到步驟2.11中制備的DNA傳感器表面，反應20-30?min,?用二次水沖洗沒結合上的Hg²⁺、Ag⁺，放到檢測池中進行ECL測定；

根據權利要求1所述負電勢發光量子點為CdTe、CdS、碳點(CQDs)；正電勢發光分子為三聯釕吡啶、魯米諾、P酸(P-acid)；多孔納米材料為多孔銀(NPS)、多空金(NPG)、PtAg合金、PtCu合金、PdAg合金、PdCu合金；

根據權利要求2所述的3D?ECL傳感器為可折疊的紙芯片傳感器；所述的工作電極為多孔金納米線修飾電極電極（Ф=2mm）；所述的含有Hg²⁺、Ag⁺的樣品為自來水、礦泉水、血樣、魚肉、海帶。