[發(fā)明專利]一種適應(yīng)大規(guī)模工業(yè)化的固定化細(xì)胞生產(chǎn)葡萄糖酸鈉的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210576825.9
• 申請日: 2012-12-27
• 公開（公告）號: CN103898170A
• 公開（公告）日: 2014-07-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王棣;王方明;李偉;王一;王居亮;孫學(xué)謙;王顯兵;李文龍;李秋紅;李曰強
• 申請（專利權(quán)）人: 山東西王糖業(yè)有限公司
• 主分類號: C12P7/58
• 分類號: C12P7/58;C12N11/14;C12N11/10;C05F11/08;C12R1/685
• 代理公司: 濟南舜源專利事務(wù)所有限公司 37205
• 代理人: 辛向東

1.一種適應(yīng)大規(guī)模工業(yè)化的固定化細(xì)胞生產(chǎn)葡萄糖酸鈉的方法，其特征在于包括黑曲霉孢子固定化菌體的制作、固定化菌體的培養(yǎng)和利用黑曲霉孢子固定化菌體發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖酸鈉過程。

2.如權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)葡萄糖酸鈉的方法，其特征在于：

所說的固定化菌體的制作過程，是將黑曲霉孢子加入蒙脫土、海藻酸鈉混合液中，混合均勻，用液壓噴散器滴入氯化鈣溶液中，形成富有彈性的黑曲霉孢子固定化小球；所說的固定化菌體的培養(yǎng)過程，是將黑曲霉孢子固定化小球移入裝有固定化菌體培養(yǎng)基的種子罐中培養(yǎng)，當(dāng)菌體開始分生菌絲時，菌體培養(yǎng)完成；所說的發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖酸鈉過程，是將完成培養(yǎng)的菌體移入裝有葡萄糖溶液的發(fā)酵罐開始發(fā)酵，不斷滴加氫氧化鈉溶液以維持pH值，當(dāng)發(fā)酵液殘?zhí)切∮?.5%時結(jié)束發(fā)酵，發(fā)酵液經(jīng)脫色、結(jié)晶制成葡萄糖酸鈉晶體；固定化菌體仍留在發(fā)酵罐內(nèi)繼續(xù)重復(fù)使用，重新向發(fā)酵罐內(nèi)添加葡萄糖溶液，繼續(xù)發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖酸鈉。

3.如權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)葡萄糖酸鈉的方法，其特征在于的具體操作步驟和工藝條件如下：

????（一）固定化黑曲霉孢子的制作

1）配制含蒙脫土1%-3%、海藻酸鈉0.8-3%混合液，消毒后備用；制備黑曲霉孢子濃度10⁹-10¹²/ml的無雜菌溶液，混勻備用；配制4-6%濃度的氯化鈣溶液消毒后備用，

2)把配制好的黑曲霉孢子溶液，加入蒙脫土、海藻酸鈉混合液中，混勻，使混合液最終濃度為：蒙脫土0.2-0.8%,海藻酸鈉0.8-1.5%，孢子濃度10⁷-10⁸/ml，

3）把混合好的黑曲霉孢子、蒙脫土、海藻酸鈉溶液用液壓噴散器滴入氯化鈣溶液中，浸泡30分鐘，形成富有彈性的孢子固定化小球；

（二）固定化菌體的培養(yǎng)

1）固定化菌體的培養(yǎng)基：玉米淀粉漿（總可溶性物質(zhì)含量≥40%）1%?，硫酸鎂0.3/%，尿素0.6%，硫酸鉀0.1%，葡萄糖5%-10%，消毒后備用（重量%），

2)配制初糖濃度為30%-35%的葡萄糖發(fā)酵液，消毒后備用，?

3)把孢子固定化小球沖洗干凈后移入裝有固定化菌體培養(yǎng)基的種子罐中培養(yǎng)20小時左右，當(dāng)菌體開始分生菌絲時，培養(yǎng)完成，移入裝有葡萄糖溶液的發(fā)酵罐，開始發(fā)酵；

???（三）葡萄糖酸鈉的生產(chǎn)

????1）發(fā)酵過程中，不斷滴加氫氧化鈉溶液以維持pH值，當(dāng)發(fā)酵液殘?zhí)切∮?.5%時結(jié)束發(fā)酵，

????2）發(fā)酵結(jié)束后，固定化菌體仍存留在發(fā)酵罐內(nèi)，分出發(fā)酵液，經(jīng)脫色、結(jié)晶，制成葡萄糖酸鈉晶體，干燥后包裝，

????3）配制30-35%的葡萄糖溶液，消毒后冷卻到40℃左右，加入存有固定化菌體的發(fā)酵罐中，繼續(xù)發(fā)酵；可反復(fù)使葡萄糖溶液在留存有固定化菌體的發(fā)酵罐中發(fā)酵生成葡萄糖酸鈉溶液，固定化菌體小球可連續(xù)反復(fù)使用6-8次，直到固定化菌體小球易于碾碎后過濾回收固定化菌體，曬干后粉碎作為有機肥料使用。