[發明專利]一種用于診斷腦血管狹窄的試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 201210576126.4
• 申請日: 2012-12-26
• 公開（公告）號: CN103045741A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發明（設計）人: 梁建濤;鮑遇海;凌鋒;霍麗蓉
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學宣武醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨

技術領域

本發明涉及一種疾病診斷試劑盒，特別涉及一種用于診斷腦血管狹窄的試劑盒及其在診斷腦血管疾病或在診斷Ⅰ型神經纖維瘤合并腦血管狹窄疾病中的應用，屬于疾病診斷領域。

背景技術

腦血管狹窄是危害人類健康的常見病，可導致高致殘率、高致死率的缺血性腦卒中。其發病機制不完全清楚，從而使腦血管狹窄的防治陷入“瓶頸”。目前，盡管隨著腦卒中1級預防、2級預防知識的普及，動脈支架、頸動脈內膜剝脫及顱內外動脈搭橋技術的應用，部分患者的腦缺血癥狀得到緩解，致殘率、致死率在一定程度上得到控制，但由于腦血管狹窄的發病原因、發病機制尚不完全清楚，而目前針對腦血管狹窄的防治僅僅處于疾病下游水平，其結果是治標不治本。同時近年來腦血管狹窄的發病率越來越高，發病年齡越來越趨于年輕化，而且常常找不到發病誘因，所以從基因水平尋找到腦血管狹窄的發生機制，從根本上降低該病的發生率，是防治腦血管狹窄的新的突破口之一。近年來，Nfl基因與血管性疾病的關系正在成為新的研究熱點，但Nf1基因突變位點多變、類型不定，突變與腦血管狹窄之間的關系尚不明確。

NF1是一種常見的常染色體顯性遺傳病，病因明確，即由17號染色體上的Nf1基因突變所致。在自然人群中的發病率約為1/3500，20%~60%有家族史，發病無明顯的性別差異。臨床表現主要為累及全身皮膚的多發性神經纖維瘤，同時NF1還可累及多個器官系統，發生腎動脈狹窄、腦血管狹窄、視神經膠質瘤、脊柱側凸、椎管內或顱內腫瘤等。

1989年，Nfl基因被定位于人類染色體17q11.2，并于1990年克隆出該基因。Nf1基因是人類基因組中較大的基因，全長350kb，含60個外顯子，其轉錄部分的長度約11-13kb。NF1基因在Genbank的登錄號為NM_001042492.2。從功能上來看，Nf1基因是抑癌基因，其編碼的由2838個氨基酸組成的蛋白質即神經纖維瘤蛋白（neurofibromin）是一種腫瘤抑制物，在機體多個組織與器官均有表達，如平滑肌細胞、血管內皮細胞及施旺細胞。神經纖維瘤蛋白的主要功能域（GAP-relateddomain，GRD）由第21-27a外顯子編碼，與GTP酶激活蛋白家族有同源性，能夠激活體內的Ras-GTPase，導致結合狀態的GTP水解，Ras失活，因此GRD是Ras信號轉導的一種負調節因子，而Ras是機體的癌基因，如Nf1基因發生突變，神經纖維瘤蛋白的質或量發生改變，Ras活性增高，從而可產生神經纖維瘤甚至惡性周圍神經鞘瘤（Malignant?Peripheral?nerve?sheath?tumor,MPNST）。

Nf1基因結構復雜，突變位點多變，突變類型不定，且在Nf1全長基因存在大量假基因，因此，Nf1基因突變的篩查仍將是一個具有挑戰性的工作。根據人類基因突變數據庫（HGMD）顯示（http://www.hgmd.org/），截止到2011年4月，共發現Nf1基因的1273個突變，包括錯義突變、剪切突變、插入、缺失及復雜重排等，但突變缺乏明顯的熱點區域，大多數散發病例各自攜帶特異的突變位點，由于不同的NF1患者臨床癥狀不一，所以甚至在同一個家系患者中的不同成員之間也存在不同的突變位點及突變類型。