[發(fā)明專利]引物及該引物檢測(cè)BCR/ABL融合基因ABL激酶區(qū)耐藥突變位點(diǎn)的方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210575817.2
• 申請(qǐng)日: 2012-12-26
• 公開（公告）號(hào): CN103045590A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李小青;孫黎;陳然;葉貴;李金歡;郝瑋;梁超;韓韜;涂贊兵;方國(guó)偉;陳貴;黃士昂
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 武漢康圣達(dá)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/11
• 分類號(hào): C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 北京聯(lián)瑞聯(lián)豐知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11411
• 代理人: 鄭自群

1.引物，包括擴(kuò)增引物和測(cè)序引物，其特征在于：

所述擴(kuò)增引物序列如下：

BCR_p210-F:5’-TGACCAACTCGTGTGTGAAACTC-3’、

ABL_p210-R：5’-TCCACTTCGTCTGAGATACTGGATT-3’、

BCR_p190-F:5’-ACCGCATGTTCCGGGACAAAAG-3’、

ABL_p190-R：5’-ACAGCATTCCGCTGACCATCAATAAG-3’、

所述測(cè)序引物序列如下：

ABL?Kinase-F：5’-TGGTTCATCATCATTCAACGGTGG-3’、

ABL?Kinase-R：5’-AGACGTCGGACTTGATGGAGAACT-3’。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述引物，其特征在于：所述的引物序列是向擴(kuò)增引物或測(cè)序引物的5’端或/和3’端延長(zhǎng)的序列。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述引物，其特征在于：所述的引物序列是和擴(kuò)增引物或測(cè)序引物同源性大于85%的序列。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述引物，其特征在于：所述的引物序列是與擴(kuò)增引物或測(cè)序引物堿基序列互補(bǔ)的序列。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述引物，其特征在于：所述的引物序列是由擴(kuò)增引物或測(cè)序引物序列中的任意一種或一種以上的組合序列。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任意一項(xiàng)所述該引物檢測(cè)BCR/ABL融合基因ABL激酶區(qū)耐藥突變位點(diǎn)的方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）、提取RNA；

（2）、進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，獲得逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物cDNA；

（3）、以步驟（2）的逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為PCR反應(yīng)模板，分別以BCR_p210-F和ABL_p210-R為上下游引物，BCR_p190-F和ABL_p190-R為上下游引物進(jìn)行第一輪PCR擴(kuò)增，獲得擴(kuò)增產(chǎn)物；

（4）、取步驟（3）的擴(kuò)增產(chǎn)物，以ABL?Kinase-F和ABL?Kinase-R為上下游引物進(jìn)行第二輪PCR擴(kuò)增，獲得擴(kuò)增產(chǎn)物；

（5）、取步驟（4）的擴(kuò)增產(chǎn)物，以ABL?Kinase-F和ABL?Kinase-R為測(cè)序引物，進(jìn)行測(cè)序檢測(cè)。