[發明專利]表達昆蟲前胸腺激素基因的重組桿狀病毒及其應用有效
| 申請號: | 201210575807.9 | 申請日: | 2012-12-26 |
| 公開(公告)號: | CN103898068A | 公開(公告)日: | 2014-07-02 |
| 發明(設計)人: | 朱禎;王曉芳;張磊;戴艷;魏曉麗 | 申請(專利權)人: | 中國科學院遺傳與發育生物學研究所 |
| 主分類號: | C12N7/01 | 分類號: | C12N7/01;C12N15/16;C12N15/866;C07K14/575;A01N57/16;A01N47/44;A01P7/04;C12R1/93 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人: | 關暢 |
| 地址: | 100101 北京市朝陽區北辰西*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 表達 昆蟲 胸腺 激素 基因 重組 桿狀病毒 及其 應用 | ||
1.表達昆蟲促前胸腺激素基因的重組桿狀病毒。
2.如權利要求1所述的重組桿狀病毒,其特征在于:所述昆蟲促前胸腺激素為如下(a)或(b)或(c):
(a)由序列表中序列7所示的氨基酸序列組成的蛋白質;
(b)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質;
(c)將(a)或(b)經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有昆蟲促前胸腺激素功能的蛋白質。
3.如權利要求2所述的重組桿狀病毒,其特征在于:所述昆蟲促前胸腺激素基因為如下1)或2)或3)或4)或5)的DNA分子:
1)序列表的序列6所示的DNA分子;
2)序列表的序列2自5’末端第30至710位核苷酸所示的DNA分子;
3)序列表的序列2所示的DNA分子;
4)在嚴格條件下與1)或2)或3)限定的DNA序列雜交且編碼所述蛋白質的DNA分子;
5)與1)或2)或3)限定的DNA序列具有90%以上同源性且編碼所述蛋白質的DNA分子。
4.如權利要求1至3中任一所述的重組桿狀病毒,其特征在于:所述重組桿狀病毒為權利要求5至8中任一所述方法制備得到的重組桿狀病毒。
5.一種制備重組桿狀病毒的方法,包括如下步驟:將重組桿狀病毒質粒導入昆蟲細胞并培養細胞,得到重組桿狀病毒;所述重組桿狀病毒質粒為具有昆蟲促前胸腺激素基因的桿狀病毒質粒;所述昆蟲促前胸腺激素為如下(a)或(b)或(c):
(a)由序列表中序列7所示的氨基酸序列組成的蛋白質;
(b)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質;
(c)將(a)(b)經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有昆蟲促前胸腺激素功能的蛋白質。
6.如權利要求5所述的方法,其特征在于:所述昆蟲促前胸腺激素基因為如下1)或2)或3)或4)或5)的DNA分子:
1)序列表的序列6所示的DNA分子;
2)序列表的序列2自5’末端第30至710位核苷酸所示的DNA分子;
3)序列表的序列2所示的DNA分子;
4)在嚴格條件下與1)或2)或3)限定的DNA序列雜交且編碼所述蛋白質的DNA分子;
5)與1)或2)或3)限定的DNA序列具有90%以上同源性且編碼所述蛋白質的DNA分子。
7.如權利要求5或6所述的方法,其特征在于:所述重組桿狀病毒質粒中,由op166啟動子和/或P10啟動子啟動所述昆蟲促前胸腺激素基因的表達。
8.如權利要求5或6或7所述的方法,其特征在于:所述重組桿狀病毒質粒中具有表達盒甲和表達盒乙;所述表達盒甲為用于表達所述昆蟲促前胸腺激素基因的表達盒;所述表達盒乙為用于表達桿狀病毒多角體蛋白的編碼基因的表達盒。
9.一種殺蟲劑,其活性成分為如下物質中的至少一種:(Ⅰ)含有昆蟲前胸腺激素基因的重組桿狀病毒、重組載體、表達盒、轉基因細胞系或重組菌;(Ⅱ)昆蟲前胸腺激素基因;(Ⅲ)昆蟲前胸腺激素。
10.如下物質中的至少一種在制備殺蟲劑中的應用:(Ⅰ)含有昆蟲前胸腺激素基因的重組桿狀病毒、重組載體、表達盒、轉基因細胞系或重組菌;(Ⅱ)昆蟲前胸腺激素基因;(Ⅲ)昆蟲前胸腺激素。
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