[發(fā)明專(zhuān)利]苯系物復(fù)合降解菌和固定化苯系物復(fù)合菌劑及其制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210573242.0
• 申請(qǐng)日: 2012-12-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103013885A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-04-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周月明;喬婧;唐薇;李斗;尹雅潔;王洋清;雷禹;黃亦存;宋立巖
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 重慶綠色智能技術(shù)研究院
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/20
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/20;C12N11/08;C12N11/02;C12R1/40;C12R1/38
• 代理公司: 北京同恒源知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11275
• 代理人: 趙榮之

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及環(huán)境污染治理領(lǐng)域，具體涉及苯系物復(fù)合降解菌，還涉及固定化苯系物復(fù)合菌劑及其制備方法。

背景技術(shù)

BTEX（苯系物）是一類(lèi)易揮發(fā)的單環(huán)芳香烴化合物，包括苯（benzene）、甲苯（toluene）、乙苯（ethylbenzene）和二甲苯（xylene），主要存在于原油和石油產(chǎn)品中，又作為工業(yè)原料廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥、塑料和纖維合成等行業(yè)中。由于BTEX本身具有致癌性和致突變性，即使是在很低的濃度下也會(huì)產(chǎn)生生物毒性，所以這類(lèi)化合物已經(jīng)成為環(huán)境關(guān)注的焦點(diǎn)。這類(lèi)化合物具有揮發(fā)性，容易進(jìn)入大氣中，參與光化學(xué)反應(yīng)，促進(jìn)臭氧生成，進(jìn)一步加劇了光化學(xué)煙霧的形成。因此BTEX化合物不僅對(duì)大氣環(huán)境造成嚴(yán)重污染，還會(huì)因地下油罐和輸油管線腐蝕滲漏等原因污染土壤和地下水源。

到目前為止，BTEX生物降解的研究主要集中在代謝途徑，動(dòng)力學(xué)模型等方面，主要研究單一菌種對(duì)BTEX的降解，但單菌通常不能同時(shí)快速地降解所有污染物。且單菌對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力較差，抗環(huán)境沖擊能力較弱，當(dāng)環(huán)境中pH、溫度、鹽度等發(fā)生變化時(shí)，單菌容易失去降解能力。混菌中各種菌產(chǎn)生的酶在降解有機(jī)物的過(guò)程中具有互補(bǔ)效應(yīng)和協(xié)同增效效應(yīng)，S.Boonchan報(bào)道了青毒菌屬真菌與細(xì)菌共培養(yǎng)對(duì)多聚芳香烴化合物具有良好的降解和礦化作用。Karthiga?Nagarajan將一株惡臭假單胞菌、一株紅球菌和一株斯氏假單胞菌混合培養(yǎng)，對(duì)BTEX的降解率明顯高于純培養(yǎng)條件下的降解率，但是不能降解BTEX中的鄰二甲苯。???????

微生物固定化技術(shù)是從20世紀(jì)60年代開(kāi)始迅速發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新術(shù)，它是通過(guò)一定的技術(shù)手段將菌體固定在載體上，避免菌體流失，提高菌體利用率，從而簡(jiǎn)化處理工藝，提高處理效率。固定化微生物在廢水處理中的應(yīng)用是十分廣泛的，它的優(yōu)勢(shì)主要是：l）濃度高，容積小，處理負(fù)荷大幅提高；2）污泥產(chǎn)量低；3）有利于優(yōu)勢(shì)菌種的固定，提高降解效率；4）對(duì)有毒物質(zhì)的承受能力強(qiáng)；5）穩(wěn)定性好。但是，傳統(tǒng)的固定化方法存在載體顆粒易破碎、傳質(zhì)阻力大、產(chǎn)氣上浮和微生物活性喪失大的缺陷。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的之一在于提供苯系物復(fù)合降解菌，對(duì)苯系物的降解效果好；本發(fā)明的目的之二在于提供一種固定化苯系物復(fù)合菌劑，本發(fā)明的目的之三在于提供固定化苯系物復(fù)合菌劑的制備方法，本方法簡(jiǎn)單，條件可控，便于工業(yè)化生產(chǎn)。

苯系物復(fù)合降解菌，所述苯系物復(fù)合降解菌為惡臭假單胞菌（Pseudomonas?putida）RW10S2、施氏假單胞菌（Pseudomonas?stutzeri）、惡臭假單胞菌（Pseudomonas?putida）ND6和惡臭假單胞菌（Pseudomonas?putida）BIRD-1的混合物。

優(yōu)選的，所述苯系物復(fù)合降解菌為惡臭假單胞菌（Pseudomonas?putida）RW10S2、施氏假單胞菌（Pseudomonas?stutzeri）、惡臭假單胞菌（Pseudomonas?putida）ND6和惡臭假單胞菌（Pseudomonas?putida）BIRD-1按重量比為1:1:1:1混合。

本發(fā)明中苯系物復(fù)合降解菌的選育方法，包括如下步驟：

（1）取垃圾填埋場(chǎng)滲濾液，置于裝有玻璃珠和蒸餾水的三角瓶中，在30℃、115?rpm條件下培養(yǎng)12小時(shí)，取菌懸液接種于含有總濃度為50?mg/L?BTEX的篩選培養(yǎng)基中，在30℃、115?rpm條件下培養(yǎng)7天。

（2）取步驟（1）所得菌液，在10000?rpm離心7?分鐘，用滅菌的生理鹽水洗滌2-3次，接種到含50?mg/L?BTEX的篩選培養(yǎng)基中，在30℃，115?rpm搖床里培養(yǎng)4天，再次傳代，共馴化10次，馴化過(guò)程中BTEX總濃度依次遞加，第1、2代BTEX總濃度50?mg/L；第3、4代BTEX總濃度100?mg/L；第5、6代BTEX總濃度150?mg/L；第7、8代BTEX總濃度175?mg/L；第9、10代BTEX總濃度200?mg/L。