[發明專利]一種實現基因組定點修飾的蛋白表達載體的方法有效
| 申請號： | 201210572536.1 | 申請日： | 2012-12-25 |
| 公開（公告）號： | CN103898099B | 公開（公告）日： | 2017-08-25 |
| 發明（設計）人： | 袁晶;王惠 | 申請（專利權）人： | 袁晶;王惠 |
| 主分類號： | C12N15/11 | 分類號： | C12N15/11;C12N15/63;C12N15/10;C12N15/64 |
| 代理公司： | 北京市柳沈律師事務所11105 | 代理人： | 鐘鳴 |
| 地址： | 100085 北京市*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 實現 基因組 定點 修飾 蛋白 表達 載體 方法 | ||
1.一種試劑盒，包括下述180個DNA序列：
(1)144個包含“雙堿基重復單元表達元件”的DNA序列，所述“雙堿基重復單元表達元件”的序列如SEQ ID NO:11～154所示；
(2)32個包含“單堿基重復單元表達元件”的DNA序列，所述“單堿基重復單元表達元件”的序列如SEQ ID NO:155～186所示；以及
(3)4個包含“末位單堿基重復單元表達元件”的DNA序列，所述“末位單堿基重復單元表達元件”的序列如SEQ ID NO:187～190所示。
2.權利要求1的試劑盒，所述試劑盒還包括
(4)已構建的哺乳動物真核表達載體，其為pCMV-TALEN。
3.權利要求1的試劑盒，包括下述180個環狀質粒：
(1)144個“雙堿基重復單元表達元件質粒”，每個質粒由一個“雙堿基重復單元表達元件”和該元件兩翼的5’和3’側翼質粒骨架序列組成，命名為pXX-n，XX為A、C、T、G的所有16種兩兩組合，n為1-9，其中所述雙堿基重復單元表達元件”的序列如SEQ ID NO:11～154所示；
(2)32個“單堿基重復單元表達元件質粒”，每個質粒由一個“單堿基重復單元表達元件”和該元件兩翼的5’和3’側翼質粒骨架序列組成，命名為pX-n，X為A、T、C或G，n為2-9，其中所述“單堿基重復單元表達元件”的序列如SEQ ID NO:155～186所示；以及
(3)4個“末位單堿基重復單元表達元件質?！保總€質粒由一個“末位單堿基重復單元表達元件”和該元件兩翼的5’和3’側翼質粒骨架序列組成，分別是pC-L、pG-L、pA-L和pT-L，其中所述“末位單堿基重復單元表達元件”的序列如SEQ ID NO:187～190所示；
其中，所述5’和3’側翼質粒骨架序列分別為SEQ ID NO:9和10。
4.權利要求3的試劑盒，所述試劑盒還包括
(4)已構建的哺乳動物真核表達載體，其為pCMV-TALEN。
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