[發明專利]一株海洋真菌桔青霉及其在制備抗腫瘤藥物中的應用

有效

• 申請號: 201210572388.3
• 申請日: 2012-12-25
• 公開（公告）號: CN103122318A
• 公開（公告）日: 2013-05-29
• 發明（設計）人: 王鴻;潘超;趙美蓉;梅建鳳;易喻;應國清
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P1/02;A61K36/06;A61P35/00;C12R1/80
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;冷紅梅

（一）技術領域

本發明涉及一株海洋真菌——半知菌綱殼霉目杯霉科桔青霉（Penicillium?citrinum）?MNP12010101，及其在制備抗腫瘤藥物中的應用。?

（二）背景技術

癌癥一直都是人類難以攻克的一個難題，尋找生理活性強的物質成為人類攻克疾病的主要工作之一。海洋微生物代謝產物研究是近年來國際上新興的研究課題。?

海洋環境苛刻，具有低溫、低照、高鹽、高壓和寡營養等特點，海洋微生物由于棲息于這樣的極限環境下,?產生了與陸地生物完全不同的代謝系統和機體防御系統，所以能產生許多結構新穎、活性特異的次級代謝產物，研究發現它們許多成分也具有抗癌，抗菌等藥用價值，并且許多特異的化學結構類型是在陸地微生物中難以發現的。?

細胞培養法是篩選抗腫瘤藥物比較常用的一種篩選方法，常用的有MTT法等。?

（三）發明內容

本發明目的是提供一株具有抗腫瘤活性的海洋真菌——桔青霉（Penicillium?citrinum）MNP12010101，及其在制備抗腫瘤藥物中的應用。?

本發明采用的技術方案是：?

一株具有抗腫瘤活性的海洋真菌——桔青霉（Penicillium?citrinum）?MNP12010101，保藏于中國典型培養物保藏中心，地址：中國，武漢，武漢大學，郵編430072，保藏編號：CCTCC?No：M?2012318，保藏日期?2012年8月28日。?

本發明菌株由浙江省東海海域采集的海水中分離和篩選得到。該菌株的菌落特征如下：涂布或劃線接種于平板培養基上生長迅速，28℃培養36?h后長出圓形、外白內綠、直徑約0.1~0.3cm的菌落；該菌株的菌體生長特征如下：在液體培養基中，28℃培養36?h后菌體呈顆粒狀生長。?

菌株的篩選純化方法為：將采集的海水運用稀釋涂布法涂于土豆平板培養基上，28℃培養至菌落數量不再增加，挑取單菌落至斜面培養基上。28℃培養2d，以菌株形態特征區別進行挑選，即得該菌株，并對該菌株進行菌種鑒定。?

所述的平板培養基和斜面培養基的組成相同，組成為：土豆150~350g/L，葡萄糖10~30g/L，瓊脂15~35g/L，溶劑為人工海水，pH7.2~8.0。?

本發明經篩選獲得的桔青霉（Penicillium?citrinum?）MNP12010101，涂布或劃線接種在平板培養基上生長迅速，28℃培養48?h后長出圓形、外白內綠、直徑約0.1~0.3?cm的菌落。?

將所述的桔青霉（Penicillium?citrinum?）MNP12010101的16sRNA部分核苷酸序列與美國國立生物信息中心（National?Center?for?Biotechnology?Information?USA，NCBI）的基因庫中的微生物16sRNA序列比對，所述桔青霉MNP12010101的18s?rRNA的部分核苷酸序列如下：?

GCCGTAGCTGAACCTGCGGAAGGATCATTACCGAGTGCGGGCCCCTCGGGGCCCAACCTCCCACCCGTGTTGCCCGAACCTATGTTGCCTCGGCGGGCCCCGCGCCCGCCGACGGCCCCCCTGAACGCTGTCTGAAGTTGCAGTCTGAGACCTATAACGAAATTAGTTAAAACTTTCAACAACG?GATCTCTTGGTTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAACTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAGTCTTTGAACGCACATTGCGCCCTCTGGTATTCCGGAGGGCATGCCTGTCCGAGCGTCATTGCTGCCCTCAAGCCCGGCTTGTGTGTTGGGCCCCGTCCCCCCCGCCGGGGGGACGGGCCCGAAAGGCAGCGGCGGCACCGCGTCCGGTCCTCGAGCGTATGGGGCTTCGTCACCCGCTCTAGTAGGCCCGGCCGGCGCCAGCCGACCCCCAACCTTTAATTATCTCAGGTTGACCTCGGATCAGGTAGGGATACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCCGGAGGAA。?

本發明還涉及所述的桔青霉MNP12010101在制備抗腫瘤藥物中的應用。?

優選的，所述抗腫瘤藥物為治療神經癌、肝癌或淋巴瘤的藥物。?

具體的，所述桔青霉MNP12010101的提取物用于制備抗腫瘤藥物。?