[發明專利]用于生產莫納甜和其前體的多肽和生物合成途徑

無效

• 申請號: 201210571611.2
• 申請日: 2006-04-26
• 公開（公告）號: CN103074394A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發明（設計）人: P·M·西克斯;S·C·麥克法蘭
• 申請（專利權）人: 嘉吉有限公司
• 主分類號: C12P13/04
• 分類號: C12P13/04;C12N1/21;C12N1/15;C12N1/19;C12N5/10;C12N15/54;C12N15/63;C12N9/10;C12R1/41
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陶家蓉

1.一種生產莫納甜的方法，包括將色氨酸和/或吲哚-3-乳酸轉化為莫納甜，所述方法包括：

將色氨酸或吲哚-3-乳酸與第一多肽接觸，所述第一多肽將色氨酸或吲哚-3-乳酸轉化為吲哚-3-丙酮酸；

將吲哚-3-丙酮酸與第二多肽和C3碳源接觸，所述第二多肽將吲哚-3-丙酮酸與所述C3碳源轉化為2-羥基2-(吲哚-3-基甲基)-4-酮戊二酸；和

將2-羥基2-(吲哚-3-基甲基)-4-酮戊二酸與第三多肽接觸，所述第三多肽將2-羥基2-(吲哚-3-基甲基)-4-酮戊二酸轉化為莫納甜。

2.如權利要求1所述的方法，所述第一多肽

a)選自：色氨酸轉氨酶(EC2.6.1.27)、色氨酸脫氫酶(EC1.4.1.19)、酪氨酸(芳族氨基酸)轉氨酶(EC2.6.1.5)、色氨酸-苯丙酮酸轉氨酶(EC2.6.1.28)、多底物轉氨酶(EC2.6.1.-)、天冬氨酸轉氨酶(EC2.6.1.1)、色氨酸氧化酶、L-氨基酸氧化酶(EC1.4.3.2)、D-氨基酸脫氫酶(EC1.4.99.1)、D-氨基酸氧化酶(EC1.4.3.3)、D-色氨酸轉氨酶、D-丙氨酸轉氨酶(EC2.6.1.21)、谷氨酸脫氫酶(EC1.4.1.2、1.4.1.3、1.4.1.4)、苯丙氨酸脫氫酶(EC1.4.1.20)、及其組合，所述第一多肽將色氨酸轉化為吲哚-3-丙酮酸；

b)選自：吲哚乳酸脫氫酶(EC1.1.1.110)、R-4-羥苯基乳酸脫氫酶(EC1.1.1.222)、3-(4)-羥基苯丙酮酸還原酶(EC1.1.1.237)、乳酸脫氫酶(EC1.1.1.27、1.1.1.28、1.1.2.3)、(3-咪唑-5-基)乳酸脫氫酶(EC1.1.1.111)和乳酸氧化酶(EC1.1.3.-)或其組合，所述第一多肽將吲哚-3-乳酸轉化為吲哚-3-丙酮酸；

c)包含SEQ?ID?NO:2、4、6、8、10、12、14、32、Genbank登錄號:NP_388848.1、Genbank登錄號:ZP00005082.1或Genbank登錄號:AAC74014.1中所示氨基酸序列；

d)包含與SEQ?ID?NO:2、4、6、8、10、12、14、32、Genbank登錄號:NP_388848.1、Genbank登錄號:ZP00005082.1或Genbank登錄號:AAC74014.1中所示序列至少90%相同的氨基酸序列；

e)包含與SEQ?ID?NO:2、4、6、8、10、12、14、32、Genbank登錄號:NP_388848.1、Genbank登錄號:ZP00005082.1或Genbank登錄號:AAC74014.1相比區別不到50個保守氨基酸取代的氨基酸序列，所述氨基酸序列將色氨酸轉化為吲哚-3-丙酮酸；或者

f)包含氨基酸氧化酶(EC1.4.3.-)或過氧化氫酶(EC1.11.1.6)，并將色氨酸轉化為吲哚-3-丙酮酸。

3.如權利要求1所述的方法，所述第二多肽

a)是EC4.1.2.-酶或EC4.1.3.-酶；

b)包含SEQ?ID?NO:66、Genbank登錄號:CAC46344、Genbank登錄號:CAB14127.1、Genbank登錄號:AAC74920.1或Genbank登錄號:CAC47463.1中所示氨基酸序列；

c)包含與SEQ?ID?NO:66、Genbank登錄號:CAC46344、Genbank登錄號:CAB14127.1、Genbank登錄號:AAC74920.1或Genbank登錄號:CAC47463.1至少90%相同的氨基酸序列；或

d)包含與SEQ?ID?NO:66、Genbank登錄號:CAC46344、Genbank登錄號:CAB14127.1、Genbank登錄號:AAC74920.1或Genbank登錄號:CAC47463.1相比區別不到50個保守氨基酸取代的氨基酸序列，所述氨基酸序列將吲哚-3-丙酮酸和丙酮酸轉化為MP。