[發明專利]一種枯草芽孢桿菌及其篩選培養方法和用于豆粕的處理方法

無效

• 申請號: 201210567223.7
• 申請日: 2012-12-24
• 公開（公告）號: CN103525715A
• 公開（公告）日: 2014-01-22
• 發明（設計）人: 吳曉峰;葛向陽;張濤
• 申請（專利權）人: 湖北邦之德牧業科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K1/14;C12R1/125
• 代理公司: 武漢凌達知識產權事務所(特殊普通合伙) 42221
• 代理人: 宋國榮

技術領域

本發明涉及一種枯草芽孢桿菌及其篩選培養方法和用于豆粕的處理方法，屬于微生物技術和發酵工程領域。?

背景技術????????????????

豆粕是大豆提取豆油后得到的一種副產品，其粗蛋白含量高，氨基酸組成平衡，營養價值較高。豆粕還含有其他豐富的營養物質，如1％-2％的脂肪，10％-15%的碳水化合物，多種礦物質和維生素以及動物體內必需的氨基酸等，營養成份比較齊全且平衡。豆粕是目前應用最廣泛的蛋白質飼料。(王春林等，2000；丁斌英等，2001)。但是，豆粕中含有大量的非淀粉多糖(Non-starch?polysaccharides，NSP)，大豆抗原蛋白和胰蛋白酶抑制因子等抗營養因子，這些抗營養因子的存在一方面抑制動物體內某些消化酶，或與營養物質絡合成不易消化的成分，使得豆粕的消化率和動物的吸收率下降；另一方面還會破壞動物體內的某些器官（李素芬，楊麗杰，1999），對動物的生理、生長、健康造成不良的影響（徐良梅，秦貴信，1999，2001）。研究表明，常規的處理方法，如通過加熱、擠壓、浸提等難以去除豆粕中抗營養因子，因此，如何消除抗營養因子對動物生產的影響一直是人們關注的焦點（Anderson，1992；Damagalski等，1992；Hong?K?J等，2004）。消除豆粕中抗營養因子，一般是減少抗營養因子的含量或是降低或鈍化其活性。國內外一直在研究這些抗營養因子的去除方法，目前主要有物理、化學、育種、生物技術等多種途徑。物理鈍化方法主要是利用抗營養因子的熱不穩定性，所以對熱穩定的抗營養因子是無效的；化學鈍化方法主要改變抗營養因子的分子結構，破壞其二硫鍵，這種方法的缺點是有化學物質殘留；植物育種方法可從根本上去除抗營養因子，但因為抗營養因子是植物的防御物質，降低含量會給植物本身帶來副作用；微生物發酵法主要是利用微生物分解、利用抗營養因子，使一些成分改變，原來動物不能消化吸收的營養物質變得可以被消化利用吸收，提高蛋白質生物轉化率，因微生物發酵法工藝簡單，產品營養性好，目前被廣泛應用與工業生產中（熊智輝等，2007）。目前采用發酵法消除豆粕抗營養因子，采用的都是多菌種混合固態發酵的方式。枯草芽孢桿菌是豆粕發酵必用的菌種之一，因為：1）枯草芽孢桿菌是農業部規定允許在飼料中使用的安全菌株；2）枯草芽孢桿菌具有較好的蛋白酶活性，能較好分解豆粕蛋白質類抗營養因子；3）枯草芽孢桿菌具有生長快、耐干燥、耐高溫等優點。因此篩選適合豆粕發酵的高效枯草芽孢桿菌，是豆粕的發酵處理技術的關鍵。

發明內容

本發明的目的是提供一種枯草芽孢桿菌及其篩選培養方法和用于豆粕的處理方法，篩選及培養出的枯草芽孢桿菌BZD-B9生長速度快，在豆粕固態發酵中能提高豆粕蛋白質水解度和TCA-N含量,促進豆粕抗營養因子分解，可抗雜菌生長，穩定發酵豆粕品質，能代替魚粉等動物蛋白質，減少動物疾病，促進健康養殖，提高產品安全性。枯草芽孢桿菌BZD-B9篩選方法、培養方法和用于豆粕的處理方法操作簡便，成本低，產品質量穩定可靠，效率高。?

本發明枯草芽孢桿菌的技術方案是：?

一種枯草芽孢桿菌，其分類命名為：枯草芽孢桿菌?BZD-B9?(Bacillus?subtilis?BZD-B9)，保藏日期為：2012年10月19日，保藏單位為：中國典型培養物保藏中心，地址：武漢市武昌珞珈山武漢大學，保藏中心保藏編號為：CCTCC?NO:?M?2012418；所述枯草芽孢桿菌BZD-B9，其形態及生理生化特征主要是：1）在LB培養基上，初時菌落為乳白色，表面有皺褶，邊緣不規則，經培養一段時間后菌落呈淡紅色；2）菌體鏡檢結果為桿狀菌，可形成芽孢，為革蘭氏陽性菌。?

所述的枯草芽孢桿菌BZD-B9，其主要生理特性為：有淀粉分解能力，能還原硝酸鹽，具有明膠液化能力，能利用檸檬酸鹽，V-P試驗、接觸酶試驗和甲基紅試驗均呈陽性。?

本發明枯草芽孢桿菌篩選方法的技術方案是：?

一種枯草芽孢桿菌的篩選方法，其步驟包括：以豆粕為基質，埋于土壤中，再經若干天富集，最后分離純化而獲得枯草芽孢桿菌BZD-B9。

本發明枯草芽孢桿菌培養方法，其步驟包括：先將枯草芽孢桿菌BZD-B9在培養基上培養一段時間，然后觀察培養基上的菌落形態，或對形成的芽孢進行檢測，最后獲取經過培養的枯草芽孢桿菌BZD-B9。?

枯草芽孢桿菌培養方法進一步的技術方案是：?