[發明專利]一種高通量清露酊微生物檢查方法

無效

• 申請號: 201210560914.4
• 申請日: 2012-12-21
• 公開（公告）號: CN103882089A
• 公開（公告）日: 2014-06-25
• 發明（設計）人: 王英俊;郝智慧
• 申請（專利權）人: 青島康地恩藥業股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

???????本發明屬于生物技術領域，涉及一種清露酊微生物限度檢查的方法，有助于醫學和生物學方面今后對微生物的研究。

背景技術

清露酊較合理地運用了中醫治標固本，滋陰潤喉，清熱解毒辨證施治。處方中桔梗、甘草清利咽喉載藥上行，配枳殼理氣升降氣機。麥冬、天冬、石斛、生地、熟地滋陰清熱潤喉消炎。全方達到滋陰潤喉，清熱解毒(利咽)。主治急慢性咽炎、喉頭水腫。本品氣味方香純正，口感良好，適宜患者服用，未見不良反應，為臨床治療急慢性咽炎、喉頭水腫良藥。

微生物限度檢查法系檢查法規定滅菌制劑及其原料、輔料受微生物污染程度的方法，也是評價生產企業的要用原料、輔料、設備、器具、工藝流程、環境和操作者衛生狀況的重要手段和依據。檢查項目包括染菌量及控制菌檢查。

發明內容

清露酊由桔梗、石斛、枳實、生地、甘草、熟地、麥冬和天冬等中藥組成，?有治療咽痛、咳喘和清熱解毒功效，?放置后出現少量沉淀，對質量功效無影響。清露酊含有15%?乙醇，低醇環境對微生物生長有干擾，可影響試驗結果的準確性。試驗表明，按常規方法測定其回收率僅為50%?~?60%，不符合要求(應為70%?以上)。通過采用薄膜過濾法測定，可以減少乙醇對試驗結果的影響。

具體實施方式

1、供試液制備?取樣品的上清液加稀釋液制成供試液。

2、菌液制備?按中國藥典2005年版二部方法制備大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌及黑曲霉菌菌液，另配制濃度為10~100cfu/ml大腸埃希菌液。

3、取供試液加濾器中經薄膜過濾后沖洗，在最后一次的沖洗液中加入大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌菌液或白色念珠菌和黑曲霉菌菌液，過濾。取出濾膜，菌面朝上貼于營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基上，培養。每株試驗菌平行制備2個平皿，計數。

實施例1

1、供試液制備?取樣品的上清液10?ml，加稀釋液至100ml，制成1?10供試液。

2、菌液制備?大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌及黑曲霉菌菌液均按中國藥典2005年版二部方法制備,?濃度為50~100cfu/ml，另配制濃度為10~100cfu?/m?l大腸埃希菌液。

3、取1?10供試液1ml加入裝有50ml稀釋液的濾器中，經薄膜過濾后，沖洗3次，每次100ml，在最后一次的沖洗液中各加入1ml的50~?100cfu?/?ml大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌菌液或白色念珠菌和黑曲霉菌菌液，過濾。取出濾膜，菌面朝上貼于營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基上，分別置30~?35℃培養48?h或置23~?28℃培養72h。每株試驗菌平行制備2個平皿。按中國藥典2005年版菌落計數方法計數。