[發明專利]鹽藻細胞活力檢測方法無效
| 申請號: | 201210559636.0 | 申請日: | 2012-12-21 |
| 公開(公告)號: | CN103884660A | 公開(公告)日: | 2014-06-25 |
| 發明(設計)人: | 張述智;夏偉;朱紹輝;張浩;王曉麗;徐權汗;李之詳;許團輝 | 申請(專利權)人: | 青島中仁藥業有限公司 |
| 主分類號: | G01N21/31 | 分類號: | G01N21/31 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 266300 山東*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 細胞 活力 檢測 方法 | ||
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技術領域
本發明屬于細胞活力測定技術領域,具體涉及鹽藻細胞活力檢測方法。
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背景技術
鹽藻誕生于38億年前,是地球上最古老的單細胞生物,可在53℃酷暑中存活、-27℃嚴寒中下繁衍,0.9%的鹽水即可殺滅細菌,鹽藻卻可以在96%的鹽水中生生不息,歷經五次生物大滅絕而不死,生命力非常頑強,積蓄了人體必需的所有營養元素,這就奠定了鹽藻對于各種疾病的理療基本要素。富含人體健康所需的抗氧化、抗輻射和提高人體免疫力的天然類胡蘿卜素及70多種礦物質和微量元素。鹽藻的獨特性在于其中的元素含量比例與人體的體液、細胞漿液相吻合,非常有利于幫助調節人體內的礦物質從失衡狀態到平衡狀態。鹽藻用現代科技手段從鹽藻培養基中提取、濃縮、精制而成,其細胞活力的檢測非常重要,目前的檢測手段均不適合鹽藻細胞活力的檢測。
發明內容
本發明的目的在于,提供一種鹽藻細胞活力檢測方法,系統準確的檢測鹽藻細胞的活力。
本發明提供的鹽藻細胞活力檢測方法,將離心管洗凈、烘干、滅菌、稱重,將培養第8天的鹽藻液倒入lOml的離心管中4500r/min離心3min,用取液器吸去上清液,重復至底部藻體重量約為0.05g,向離心管中加入TTC溶液1.5ml,于25℃下避光反應18h,取出離心管,加蒸餾水4500?r/min離心3min,用取液器吸去上清液,加蒸餾水4500?r/min離心5min,棄上清,向離心管中加入95%乙醇5ml,lO0℃水浴下煮沸20min,4500?r/min離心3min,取出上清液移入對應的試管中,加入95%乙醇5ml,lO0℃水浴下保溫20min,4500?r/min離心3min,取出上清液移入同一試管中,將兩次乙醇萃取液混勻,定容為lOml,于530nm下測定其吸光度值。?
本發明提供的鹽藻細胞活力檢測方法,其有益效果在于,方法簡單易操作,能快速檢測出鹽藻細胞的活力,且非常準確,適合規模化生產。
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具體實施方式
下面結合一個實施例,對本發明提供的鹽藻細胞活力檢測方法進行詳細的說明。
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實施例
本實施例的鹽藻細胞活力檢測方法,將離心管洗凈、烘干、滅菌、稱重,將培養第8天的鹽藻液倒入lOml的離心管中4500r/min離心3min,用取液器吸去上清液,重復至底部藻體重量約為0.05g,向離心管中加入TTC溶液1.5ml,于25℃下避光反應18h,取出離心管,加蒸餾水4500?r/min離心3min,用取液器吸去上清液,加蒸餾水4500?r/min離心5min,棄上清,向離心管中加入95%乙醇5ml,lO0℃水浴下煮沸20min,4500?r/min離心3min,取出上清液移入對應的試管中,加入95%乙醇5ml,lO0℃水浴下保溫20min,4500?r/min離心3min,取出上清液移入同一試管中,將兩次乙醇萃取液混勻,定容為lOml,于530nm下測定其吸光度值。
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