[發明專利]多細胞共培養皿及使用方法無效
| 申請號: | 201210559404.5 | 申請日: | 2012-12-20 | 
| 公開(公告)號: | CN103031252A | 公開(公告)日: | 2013-04-10 | 
| 發明(設計)人: | 唐培培;相萍萍;張碩 | 申請(專利權)人: | 唐培培;相萍萍;張碩 | 
| 主分類號: | C12M3/00 | 分類號: | C12M3/00;C12M1/22 | 
| 代理公司: | 江蘇致邦律師事務所 32230 | 代理人: | 楊曄雋 | 
| 地址: | 210023 江蘇省南京市棲*** | 國省代碼: | 江蘇;32 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 細胞 培養皿 使用方法 | ||
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?技術領域
?本發明涉及微生物細胞培養裝置領域,尤其涉及一種多細胞共培養皿及其使用方法。
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?背景技術
????當前,創建與體內相似的生長環境,促使細胞增殖、分化及呈現出類似體內組織結構和功能性狀是體外細胞培養的發展趨勢。目前已有的體外單細胞培養技術,雖然其具有培養簡單、易操作、費用低、可大量應用的優點,但由于人體是一個復雜的微環境,細胞的生長,增殖,分化并不是在一個獨立的環境下發生的,而是通過體內的循環系統和內分泌系統相互聯系,相互作用,所以不能真實模擬體內環境,而使細胞失去原有的生物學活性。越來越多人認識到單層細胞培養技術的局限,并進而提出了共培養技術。目前有兩種細胞共培養體系,一為直接共培養體系,即將2種或2種以上的細胞同時或分別接種于同一孔中,不同種類的細胞之間直接接觸;二為間接共培養體系,即將2種或2種以上的細胞分別接種于不同的載體上,然后將這兩種載體置于同一培養環境之中,使不同種類的細胞共用同一種培養體系而不直接接觸。但是此類培養技術也存在較多的局限性,例如與體內環境還是具有很大差別,并不能完全反映體內的變化;若觀察兩-兩細胞之間的相互作用,將花費大量的時間、精力和費用;利用Transwell小室進行的細胞遷徙共培養時具有培養基無法統一及觀察細胞生長很不方便的缺點。故而,當前存在的兩種技術均不能滿足當前的實驗需求。
另外,人體是一個復雜的環境,多種細胞之間相互作用,但有些疾病的發生往往與其中的某一關鍵細胞有直接關系,如破骨細胞是類風濕關節炎(RA)骨質破壞中的關鍵細胞,單核細胞是破骨細胞的前體細胞,那么,在進行實驗時,需要研究哪些細胞存在誘導單核細胞轉化為破骨細胞可能性,這就需要以單核細胞為研究靶細胞,觀察其他細胞(如滑膜樣成纖維細胞、淋巴細胞、成骨細胞)對它的單獨作用和協同作用,現有的多細胞共培養皿只能觀察這些細胞共同作用的結果,而無法針對單核細胞進行上述研究。
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發明內容
本發明要解決的技術問題在于克服上述不足,提供一種能夠最大程度地模擬體內環境,并且針對性的研究某一特定靶細胞的多細胞共培養皿。
為解決上述問題,本發明提供一種多細胞共培養皿,包括殼體、卡槽、隔板,殼體被隔板、卡槽分成特定細胞腔室和3個以上的周圍腔室,周圍腔室環繞在特定細胞腔室周圍,特定細胞腔室周圍的隔板為可拆卸式隔板,周圍腔室之間的隔板為固定隔板。
優選的隔板旁設有隔膜,隔板上設有提拉裝置,隔膜材質為聚碳酸酯膜,隔板材質為塑料或者玻璃,隔板上的提拉裝置可以是設置在與隔膜相對另一邊上半部或頂部中間的橫向凸起,該橫向凸起可以是片狀的半圓形或方形;隔板上的提拉裝置還可以是設置在與隔膜相對另一邊上半部或頂部中間的橫向凹凸條紋。通過上述橫向凸起或凹凸條紋,可以輕易的將隔板從殼體中拆離。
優選的卡槽與隔板之間,隔板與殼體之間作密封處理,使隔板未拆離殼體時,周圍腔室與特定細胞腔室之間,周圍腔室之間相互獨立,腔室內藥液不能相互流通、滲透;殼體與隔膜連接處,隔膜與卡槽連接處設有密封裝置,防止隔板拆離后,腔室之間的液體未經隔膜互通。
優選的殼體為棱柱形,比如三棱柱形、四棱柱形、五棱柱形、六棱柱形等,特定細胞腔室形狀為與殼體形狀相同的棱柱形,其底面邊長小于殼體,設在殼體中心,周圍腔室面積相等。
優選的特定細胞腔室和殼體為形狀相同的正棱柱形。特定細胞腔室的底面邊長為殼體底面邊長的一半,特定細胞腔室的側棱設置在殼體側面中間。該設計使得各個周圍腔室與特定細胞腔室之間的接觸面積相等,周圍腔室對特定細胞的作用機會均等。
優選的特定細胞腔室外壁及周圍腔室上設有刻度,用以度量各腔室內液體劑量。
優選的殼體上設有殼蓋,殼蓋上設有密封裝置。
優選的隔膜設置在隔膜安裝插片上,從而節省隔膜使用面積,降低成本。
培養皿還可以做成特定細胞腔室周圍的隔板為可拆卸式隔板,周圍腔室之間的隔板也為可拆卸式隔板的式樣。
該多細胞共培養皿的使用方法,步驟如下:(1)、對多細胞培養皿進行滅菌;(2)、將多細胞培養皿置于無菌操作臺下,進行細胞接種及相關操作;(3)、按需拆離隔板,進行實驗觀察;(4)、按需插入隔板,進行實驗觀察。
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本發明與現有技術相比具有的有益效果是:
(1)研究其他多個細胞對某一特定靶細胞的單獨作用及協同作用。
(2)運用于多個細胞之間,研究多種細胞間的相互關系。
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