[發(fā)明專利]一種藍(lán)莓果化學(xué)組分研究的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210559373.3
• 申請日: 2012-12-21
• 公開（公告）號: CN102998398A
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 呂兆林;干蘇靈;潘月;雷美玲;郭弘璇;林西;張柏林;侯智霞
• 申請（專利權(quán)）人: 北京林業(yè)大學(xué)
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
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• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種藍(lán)莓果化學(xué)組分研究的方法，尤其是涉及一種氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)柱前衍生化法研究藍(lán)莓果化學(xué)組分的研究方法。

背景技術(shù)

藍(lán)莓是世界糧農(nóng)組織推薦的五大健康水果之一，具有很強(qiáng)的抗氧化能力；能夠預(yù)防高血壓、高血脂及肥胖，特別是對眼睛的健康有特別的好處。藍(lán)莓中含有豐富的多酚類、黃酮類以及多糖類物質(zhì)，特別是其中的花青素具有促進(jìn)視力的功效，是提供藍(lán)莓保健功效的重要因子。

對藍(lán)莓果的化學(xué)組分的研究是合理利用藍(lán)莓資源的基礎(chǔ)。近年來，藍(lán)莓果實(shí)中的化學(xué)組分的結(jié)構(gòu)鑒定引起了越來越多研究者的廣泛興趣。到目前為止，研究者多數(shù)使用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(HPLC-MS)為研究手段，少量研究者用核磁共振儀(NMR)研究其化學(xué)組分結(jié)構(gòu)。氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS)是另一種廣譜的化學(xué)組分研究手段，具有線性范圍寬、靈敏度高、使用成本低、應(yīng)用廣泛的特點(diǎn)，而迄今尚未有相關(guān)手段研究藍(lán)莓化學(xué)組分的報(bào)道。為了更全面細(xì)致地研究藍(lán)莓果化學(xué)組分，需嘗試開發(fā)一種GC-MS研究其化學(xué)組分的快捷、簡便、經(jīng)濟(jì)、實(shí)用的新方法。

本研究以采用高效、快捷、簡便、經(jīng)濟(jì)的手段研究藍(lán)莓果化學(xué)組分為研究目標(biāo)，采用GC-MS柱前衍生化法研究藍(lán)莓果化學(xué)組分，為全面細(xì)致地研究藍(lán)莓果化學(xué)組分提供工藝參數(shù)，為合理利用生物量豐富的藍(lán)莓資源提供指導(dǎo)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在以我國資源十分豐富的藍(lán)莓果為原料，開發(fā)一種GC-MS柱前衍生化法研究藍(lán)莓果化學(xué)組分的簡便、經(jīng)濟(jì)、實(shí)用的新方法。

一種GC-MS柱前衍生化法研究藍(lán)莓果化學(xué)組分的方法，其流程示意圖見圖1，其特征在于：

1)制備藍(lán)莓果化學(xué)組分提取液

將藍(lán)莓鮮果用榨汁機(jī)研磨，得到藍(lán)莓果泥，準(zhǔn)確稱量藍(lán)莓果泥5g左右，用不同體系不同配比的有機(jī)溶液作為提取液浸沒果泥，室溫浸提2小時(shí)，1500rpm離心10分鐘，取上清液，該上清液為藍(lán)莓果化學(xué)組分提取液，其中所述不同體系不同配比的有機(jī)溶液的體積為100-200mL，所述的不同體系不同配比的有機(jī)溶液有四種，第一種為含甲酸的甲醇溶液，所述的甲醇溶液中含甲酸的體積百分比為0.1-1％；第二種為甲醇溶液，所述的甲醇溶液的體積濃度(V/V)為30％-60％；第三種為丙酮溶液，所述的丙酮溶液的體積濃度(V/V)為40％-70％；第四種為乙醇溶液，所述的乙醇溶液的體積濃度(V/V)為30％-60％；

2)提取液衍生化

將1mL提取液置于離心中，用氮吹儀吹干，再加入0.1-1mL?BSTFA衍生化試劑，放入烘箱中，60-100℃保溫1h，取出后冷卻至室溫，得到衍生化溶液；

3)GCMS儀測試衍生化溶液

設(shè)置GCMS儀器條件，測試衍生化溶液，得到衍生化溶液總離子流圖、各峰所對應(yīng)的化合物質(zhì)譜圖等數(shù)據(jù)信息，所述的GCMS儀器條件為Rtx-5石英毛細(xì)管柱，進(jìn)樣口溫度280℃，分流比10∶1，程序升溫，接口溫度250℃，進(jìn)樣量1微升，所述的程序升溫程序?yàn)橹鯗?00℃，升溫速率6℃/min，升至250℃，繼續(xù)升溫，速率15℃/min，升至280℃，保持時(shí)間20min；

4)獲得藍(lán)莓果化合物組分信息

利用得到衍生化溶液數(shù)據(jù)信息，利用圖譜庫檢索和人工圖譜解析確定化合物結(jié)構(gòu)。

附圖說明

圖1.GC-MS柱前衍生化法研究藍(lán)莓果化學(xué)組分方法流程示意圖

圖2.0.1％甲酸的甲醇溶液提取物經(jīng)衍生化后的GC-MS總離子流圖

圖3.30％甲醇溶液提取物經(jīng)衍生化后的GC-MS總離子流圖

圖4.丙酮∶水∶乙酸溶液提取物經(jīng)衍生化后的GC-MS總離子流圖

圖5.50％乙醇溶液提取物經(jīng)衍生化后的GC-MS總離子流圖

具體實(shí)施方式

以下，關(guān)于本發(fā)明的一種藍(lán)莓果化學(xué)組分研究的方法，基于實(shí)施方式進(jìn)行說明。

一種藍(lán)莓果化學(xué)組分研究的方法，其步驟為：

1)制備藍(lán)莓果化學(xué)組分提取液