[發明專利]利用酶生產蝦青素的方法

有效

• 申請號: 201210557317.6
• 申請日: 2012-12-19
• 公開（公告）號: CN103044303A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發明（設計）人: 劉立國;王倩;劉柏楠
• 申請（專利權）人: 廣州優銳生物科技有限公司
• 主分類號: C07C403/24
• 分類號: C07C403/24;C12N1/12;C12N9/42;C12R1/89;C12R1/885
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 萬志香;胡杰

1.一種利用酶生產蝦青素的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）康氏木霉的培養：將康氏木霉孢子懸浮液接入PDY液體培養基中，培養1.5-2.5d，離心去上清液，得康氏木霉菌菌泥；

（2）康氏木霉發酵物的培養：取步驟（1）所得的康氏木霉菌菌泥接入固體發酵培養基中，先于30-32℃下培養29-31h，后于26-28℃下培養75-90h，離心去上清液，得康氏木霉發酵物；

（3）雨生紅球藻的擴培：將雨生紅球藻接入BBM培養基并置于封閉式光生物反應器中，通空氣培養1.5-2.5d，離心去上清液，得雨生紅球藻藻泥；

（4）富集蝦青素的雨生紅球藻藻粉的制備：將步驟（3）所得的雨生紅球藻藻泥接入BBM培養基中，通入CO₂，通氣量為0.5～1.5L/(L·min)并于32-35℃培養2-3d，離心去上清液，冷凍干燥得富集蝦青素的雨生紅球藻藻粉；

（5）蝦青素干粉的制備：將步驟（2）所得的康氏木霉發酵物和步驟（4）所得的富集蝦青素的雨生紅球藻藻粉混合，勻質，離心，過濾取固體相，冷凍干燥，得蝦青素干粉；

（6）蝦青素的萃取：用玉米油萃取步驟（5）所得的富含蝦青素的干粉，即可得蝦青素。

2.根據權利要求1所述的酶生產蝦青素的方法，其特征在于，步驟（1）所述的PDY液體培養基的組成及重量份配比如下：馬鈴薯18-22wt%，葡萄糖1.5-2.5wt%，酵母膏0.8-1.2wt%，余量為水。

3.根據權利要求1所述的酶生產蝦青素的方法，其特征在于，步驟（1）所述的康氏木霉孢子懸浮液接入量為：康氏木霉孢子懸浮液與PDY液體培養基的重量份配比為1：9-11，所述康氏木霉孢子懸浮液中康氏木霉孢子的濃度為0.04-0.06mg/L，所述的培養條件為溫度23-27℃、轉速120-150r/min。

4.根據權利要求1所述的酶生產蝦青素的方法，其特征在于，步驟（2）所述的康氏木霉菌菌泥的接入量為：康氏木霉菌菌泥與固體發酵培養基的重量份配比為1：490-560。

5.根據權利要求1所述的酶生產蝦青素的方法，其特征在于，步驟（2）所述的固體發酵培養基的組成及重量份配如下：豆粕0.9-1.1份、稻草11-13份、麩皮9-11份、羧甲基纖維素鈉0.75-0.85份、吐溫-800.009-0.011份、（NH₄）₂SO₄0.07-0.09份、水28-30份。

6.根據權利要求1所述的酶生產蝦青素的方法，其特征在于，步驟（3）所述的封閉式光生物反應器的參數為：溫度25-28℃，光照55-65μmol·m^-2·s^-1。

7.根據權利要求1所述的酶生產蝦青素的方法，其特征在于，步驟（3）所述的BBM培養基的組成及重量份配比如下：硝酸鈉245-255份，磷酸二氫鉀170-180份，磷酸氫二鉀70-80份，七水硫酸鎂70-80份，二水氯化鈣23-38份，氯化鈉23-38份，EDTA48-53份，氫氧化鉀29-33份，七水硫酸亞鐵4.8-5份，硼酸11-12份，七水硫化鋅8.5-9份，氯化錳1.4-1.5份，氧化鉬0.7-0.8份，五水硫酸銅1.5-1.6份，六水硝酸鈷0.7-0.8份，蒸餾水1000ml。

8.根據權利要求1所述的酶生產蝦青素的方法，其特征在于，步驟（3）所述的雨生紅球藻的接入量為：每100mL?BBM培養基中接入雨生紅球藻3-5g。

9.根據權利要求1所述的酶生產蝦青素的方法，其特征在于，步驟（4）所述的BBM培養基的組成及重量份配比如下：七水硫酸鎂70-80份，二水氯化鈣23-38份，氯化鈉23-38份，EDTA48-53份，氫氧化鉀29-33份，七水硫酸亞鐵4.8-5份，硼酸11-12份，七水硫化鋅8.5-9份，氯化錳1.4-1.5份，氧化鉬0.7-0.8份，五水硫酸銅1.5-1.6份，蒸餾水1000ml。

10.根據權利要求1所述的酶生產蝦青素的方法，其特征在于，步驟（4）所述的雨生紅球藻藻泥的接入量為：每100mL?BBM培養基中接入雨生紅球藻藻泥20-25g。