[發明專利]一種葡萄耐鹽性的快速鑒定方法

在審

• 申請號: 201210556539.6
• 申請日: 2012-12-20
• 公開（公告）號: CN103875469A
• 公開（公告）日: 2014-06-25
• 發明（設計）人: 李洪山;申玉香
• 申請（專利權）人: 鹽城工學院
• 主分類號: A01G7/00
• 分類號: A01G7/00;A01G31/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種葡萄耐鹽性的快速鑒定方法。該項內容可以適用于扦插類木本植物的耐鹽種質資源的快速鑒定與篩選，屬于農業生物技術領域。

背景技術

當前全球土地沙漠化、鹽堿化逐步加重，全球鹽堿地正以每年100～150萬公頃的速度增長。我國鹽堿地主要分布在17個省區，具有農業利用潛力的鹽堿荒地、鹽堿障礙耕地面積近2億畝，由于我國目前環境、資源等壓力不斷增大，加之城鎮占地、工業占地擴大，因此積極改良、開發利用鹽堿地資源對緩解土地壓力、增加后備耕地儲備、保障農業生產安全具有重要意義。

葡萄是我國果樹中的主栽品種之一，在農業經濟中的具有重要地位，中國的葡萄栽培已有數千年歷史。但葡萄屬于對鹽堿敏感的非鹽生植物，過量的鹽堿不僅影響葡萄的生長、產量和品質，還會引起葉斑、落葉、枯枝甚至死樹，但因自身的遺傳和栽培條件不同，不同品種間耐鹽堿性存在明顯的差異。

葡萄對土壤的適應性較強，除了沼澤地和重鹽堿地不適宜生長外，其余各類型土壤都能栽培。鹽害對葡萄的傷害主要表現在滲透脅迫、離子毒害與養分不均衡、膜傷害三個方面，在葡萄的耐鹽性指標評價上多采用形態指標、生長量指標、土壤含鹽量指標和生理生化指標等的綜合。目前對葡萄耐鹽性評價多以葡萄苗為試驗材料，由于葡萄苗的育成常常要1-2年，而且需要一定空間和時間，從而導致葡萄耐鹽性評價試驗周期長，花費成本高，亦阻礙了葡萄耐鹽種質資源的篩選與推廣進程。

發明內容

為高效快速鑒定葡萄的耐鹽性能，本發明提供了一種方法簡單、成本低廉、評價直觀、試驗周期較短的葡萄耐鹽性快速鑒定方法。

本發明通過以下技術方案實現：

一種葡萄耐鹽性的快速鑒定方法，包括以下步驟：

(1)冬春季剪伐的帶芽插條長度要求在15-20cm，莖徑1cm左右，芽飽滿，插條帶芽數3-5個。

(2)插條在置入培養液之前將最低位芽下3cm左右位置剪成斜面，在插條頂端用保鮮膜包裹。

(3)營養液為含有細胞分裂素的Hoagland培養液，營養液中含1/10的Hoagland培養液，細胞分裂素選用下列之一，6-芐氨基腺嘌呤(6-BA)0.1～1.0mg/L，或者萘乙酸(NAA)0.01～0.02mg/L，或者吲哚乙酸(IAA)0.2～0.5mg/L，營養液每5天更換一次。

(4)將插條預處理后按生長方向將下端置入有營養液的廣口瓶中，在25℃，18R:6D的光照培養箱中促芽萌發、出葉。

(5)在葡萄芽出葉達到3～5個展平葉時，將帶有葉片的插條分組，分別置于不同氯化鈉濃度的溶液中繼續培養，用于協迫生長的溶液中氯化鈉濃度為0～0.6％，濃度梯度0.05％或者0.1％。

(6)逐日觀測記載葉的變化，葉的生長速度，具體包括芽心葉葉片的顏色變化(黃化、失綠、枯黃)、已出葉片的顏色變化(黃化、失綠、枯黃)、出葉速度、以及落葉狀況。

(7)以“鹽害分級標準”考查方法為主要描述評價葡萄的耐鹽性，評價葡萄能夠適應在某個鹽濃度生長的形態指標(以清水培養的葡萄性狀指標為參照)：芽心出葉正常、出葉速度正常、展開正常、10％以下葉片有失綠斑、無鹽害性枯落葉。

(8)鹽害分級標準

0級：生長正常，無鹽害癥狀；

1級：輕度鹽害，有少部分葉尖、葉緣變黃枯干，鹽害性枯落葉量小于總葉量的20％；

2級：中度鹽害，有相當一部分葉尖、葉緣焦枯，鹽害性枯落葉量約占總葉量的20％～50％；

3級：重度鹽害，大部分葉尖、葉緣焦枯，半數以上的葉片枯死或脫落，鹽害性枯落葉量約占總葉量的50％～80％；

4級：極重度鹽害，超過80％的葉片枯死甚至脫落，僅有少量綠色，甚至全株死亡。

附圖說明

圖1.藤稔葡萄插條與盆栽苗脯氨酸含量變化

圖2.不同品種葡萄插條SOD酶活性

圖3.不同品種葡萄插條MDA含量變化

圖4.不同品種葡萄插條脯氨酸含量

具體實施方式

本發明的實施例體現了本專利保護范圍，但本專利保護范圍不局限以下實施例。