[發明專利]一種黃姑魚雌核發育二倍體的誘導方法

有效

• 申請號: 201210555105.4
• 申請日: 2012-12-19
• 公開（公告）號: CN102986571A
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發明（設計）人: 徐冬冬;樓寶;薛寶貴;史會來;詹煒;馬世磊;毛國民
• 申請（專利權）人: 浙江省海洋水產研究所
• 主分類號: A01K61/00
• 分類號: A01K61/00
• 代理公司: 青島聯智專利商標事務所有限公司 37101
• 代理人: 崔濱生

1.一種黃姑魚雌核發育二倍體的誘導方法，其特征在于它包括以下步驟：

(1)黃姑魚或條石鯛精子的遺傳滅活

黃姑魚精子的遺傳物質滅活：將黃姑魚精液用精子稀釋液稀釋25～75倍，置于18～72mJ/mm²紫外線強度照射；?

條石鯛精子的遺傳物質滅活：將條石鯛精液用精子稀釋液稀釋20～50倍，置于12～54mJ/mm²紫外線強度照射；?

(2)未受精卵與滅活精子的授精

將經紫外照射的滅活精液5～30mL與成熟的黃姑魚卵子20～200mL混合，輕輕搖動混勻，加入5～10mL海水后繼續混勻，再加入20～200mL海水置于22～23℃室溫下放置1～4min，用于染色體加倍處理；

(3)雌核發育魚卵染色體加倍

在授精后1～4min，將卵浸入0～4.5℃的海水浴中進行處理5～20min，取出處理后的卵在12～15℃海水過渡10～15min，然后放入22～23℃海水中準備進行孵化；?

(4)染色體加倍冷休克誘導處理

在休克溫度0～4.5℃、冷休克時間5～20min條件下誘導雌核發育二倍體。

2.根據權利要求1所述的一種黃姑魚雌核發育二倍體的誘導方法，其特征在于：所述步驟(1)中精子稀釋液配方為NaCl?6g/L，KCl?0.4g/L，CaCl₂?0.2g/L，pH值7.0。

3.根據權利要求2所述的一種黃姑魚雌核發育二倍體的誘導方法，其特征在于：所述步驟(1)中黃姑魚精液稀釋40～50倍，黃姑魚精子紫外滅活的最適劑量為42mJ?/mm²。

4.根據權利要求1或2所述的一種黃姑魚雌核發育二倍體的誘導方法，其特征在于：所述步驟(1)中條石鯛精液稀釋30～40倍，條石鯛精子紫外滅活的最適劑量為30mJ/mm²。

5.根據權利要求1或2所述的一種黃姑魚雌核發育二倍體的誘導方法，其特征在于：所述步驟(1)中黃姑魚精子和條石鯛精子遺傳物質滅活所用稀釋液的厚度為0.1～0.3cm。

6.根據權利要求1所述的一種黃姑魚雌核發育二倍體的誘導方法，其特征在于：所述步驟(3)中授精后2min染色體開始加倍的誘導率最高。

7.根據權利要求1所述的一種黃姑魚雌核發育二倍體的誘導方法，其特征在于：所述步驟(4)中在2.5～3.5℃下冷休克處理8min的雌核發育誘導率最高。