[發明專利]一種木醋桿菌及混合菌群發酵高產細菌纖維素的方法

有效

• 申請號: 201210554583.3
• 申請日: 2012-12-19
• 公開（公告）號: CN103060229A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發明（設計）人: 劉冬梅;王盼;費永濤;黎嘉惠;黃丹華;吳暉;唐語謙;余以剛
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P39/00;C12P19/04;C12R1/02;C12R1/225;C12R1/01
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 宮愛鵬

1.一種木醋桿菌，其特征在于，所述木醋桿菌（Gloconacetobacterxylinum）HNX01，已于2011年8月19日，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，簡稱CGMCC，保藏編號為CGMCC?No.5173。

2.一種混合菌群發酵高產細菌纖維素的方法，其特征在于，其中混合菌群包括木醋桿菌CGMCC?No.5173、醋桿菌（Acetobacter?sp.）AC-0720，已于2012年9月28日，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，簡稱CGMCC，保藏編號為CGMCC?No.6641；和乳桿菌（Lactobacillus?sp.）DMDL9010，已于2011年8月19日，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，簡稱CGMCC，保藏編號為CGMCC?No.5172。

3.根據權利要求2所述方法，其特征在于，所述發酵高產細菌纖維素的方法包括如下步驟：

（1）分別將乳桿菌DMDL9010、醋桿菌AC-0720、木醋桿菌HNX01分別按如下的步驟進行高密度培養，三株菌的種子液的活菌數分別達到108CFU/mL以上；

（2）將醋桿菌AC-0720與乳桿菌DMDL9010的種子液在椰子水中混合發酵，使兩菌的活菌數分別達到10⁸CFU/mL以上，制成發酵椰子水；所述椰子水的處理工藝為：將椰子破殼取水，然后用100目~300目的濾網過濾，過濾后滅菌，冷卻后備用，制得椰子水；

（3）細菌纖維素發酵培養基的配制：首先，制備水合發酵培養基：蔗糖50g/L~70g/L，蛋白胨1.0g/L~1.9g/L，酵母提取粉0.1g/L~0.4g/L，檸檬酸0.2g/L~0.9g/L，KH₂PO₄0.1g/L~0.9g/L，MgSO₄.H₂O1.5g/L~1.9g/L，(NH₄)₂SO₄1.0g/L~1.9g/L，將上述原料攪拌溶解均勻后，調節pH至3.5~5.0，滅菌，冷卻后備用；然后，以體積百分比計，將發酵椰子水20份~50份與50份~80份水合發酵培養基混合均勻后滅菌，冷卻后即得到細菌纖維素發酵培養基；

（4）發酵生產細菌纖維素：以體積比為10~30：100，將木醋桿菌HNX01種子液接種到細菌纖維素發酵培養基中，于20°C~35°C，靜止培養120h~216h，即得到細菌纖維素。

4.根據權利要求3所述方法，其特征在于，

所述乳桿菌DMDL9010種子液的制備：將0.1g~0.5g乳桿菌DMDL9010凍干粉接種到10mL的DMDL9010種子培養基中，于25℃~40℃靜止培養20h~28h，制成DMDL9010第一次種子液；以體積比為5~10：100，將第一次種子液接種到DMDL9010種子培養基中，于25℃~40℃靜止培養20h~28h；

所述醋桿菌AC-0720種子液的制備：將0.1g~0.5g醋桿菌AC-0720凍干粉接種到10mL的AC-0720種子培養基中，于20℃~35℃靜止培養24h~72h，制成AC-0720第一次種子液；以體積比為5~10：100，將AC-0720第一次種子液接種到AC-0720種子培養基中，于20℃~35℃靜止培養24h~72h；

所述木醋桿菌HNX01種子液的制備：將0.1g~0.5g木醋桿菌HNX01的凍干粉接種到10mL的HNX01種子培養基中，于20℃~35℃靜止培養24h~72h，制成HNX01第一次種子液；以體積比為5~10：100，將HNX01第一次種子液接種到HNX01種子培養基中，于20℃~35℃靜止培養24h~72h。