[發明專利]季也蒙畢赤酵母發酵酒糟水解液生產木糖醇的方法

無效

• 申請號: 201210551958.0
• 申請日: 2012-12-18
• 公開（公告）號: CN102994575A
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發明（設計）人: 張麗媛;姚笛;王穎;李秀波;胡亞光
• 申請（專利權）人: 黑龍江八一農墾大學
• 主分類號: C12P7/18
• 分類號: C12P7/18;C12R1/84
• 代理公司: 大慶知文知識產權代理有限公司 23115
• 代理人: 陳可鑫

1.一種季也蒙畢赤酵母發酵酒糟水解液生產木糖醇的方法，其特征在于：包括以下步驟：

（1）制備酒糟水解液

將烘干后的酒糟粉碎至粒徑40目，?按1:5的比例（w/v）與0.1%的NaOH溶液混合，攪拌下加熱煮沸l?h，冷卻后用濾布過濾，棄去濾液，用清水洗滌濾渣，再將濾渣與1000?mL水共煮l?h，過濾，除去灰分后的濾渣留待下步水解；采用由1%HCl和1%?H₃PO₄所組成的混合酸水解酒糟，水解溫度100℃，固液比1:10（w/v），水解2?h；水解液85℃濃縮至木糖含量40?g/L，再以1:10的比例（w/v）加入活性炭脫色；用石灰乳中和至pH?5.0，抽濾去除Ca₃(PO₄)₂沉淀后，所得水解液于4℃冷藏備用；

（2）培養基配制

YPD培養基：配制YPD斜面培養基，用于菌種的活化；

種子培養基：含木糖20g/?L的原始酒糟水解液100mL，酵母膏10?g/L，蛋白胨20?g/L，MgSO₄·7H₂O?0.2?g/L，KH₂PO₄?5g/L，?pH5.5，110℃滅菌20?min；

發酵培養基：含木糖40g/L?的90mL濃縮酒糟水解液中，補加10?mL有機氮源溶液，有機氮源溶液為酵母膏10g/L及蛋白胨20g/L；起始pH5.0，110℃滅菌20?min；

（3）木糖醇發酵

斜面培養：將季也蒙畢赤酵母菌種接種于YPD試管斜面上；

液體種子培養：取斜面菌種1環，接入液體種子培養基中，?250mL三角瓶裝種子培養基液量50?mL，于28℃，搖床200?r?/min培養24?h，以使畢赤酵母適應酒糟水解液環境；

搖瓶發酵：將液體種子接種至發酵培養基中，搖瓶培養的最優工藝為：裝液量為1/5；接種量5%?，溫度為28?℃，轉速為180?r/min，發酵48?h結束，制得含木糖醇的發酵液;

用高效液相色譜儀測定，得出保留時間和色譜峰面積，測得木糖醇的含量。

2.根據權利要求1所述的季也蒙畢赤酵母發酵酒糟水解液生產木糖醇的方法，其特征在于：所述的采用高效液相色譜儀測定時色譜條件為：Thermo-NH₂柱；柱溫：常溫；流動相：乙腈：水=85：15；流速：1mL/min；示差折光檢測器檢測，進樣量為20μL。