[發明專利]從歐亞旋覆花中提取活性倍半萜內酯的方法

無效

• 申請號: 201210551001.6
• 申請日: 2012-12-18
• 公開（公告）號: CN103864736A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 師彥平;楊軍麗
• 申請（專利權）人: 中國科學院蘭州化學物理研究所
• 主分類號: C07D307/93
• 分類號: C07D307/93
• 代理公司: 蘭州中科華西專利代理有限公司 62002
• 代理人: 方曉佳

技術領域

本發明涉及一種以菊科植物歐亞旋覆花干燥頭狀花序為原料提取純化一種具有多種藥理活性的倍半萜內酯的方法。?

背景技術

歐亞旋覆花【Inula?britannica?L.】，系菊科旋覆花屬多年生草本植物。主要分布于新疆北部至南部、黑龍江（黑河、克山等）、內蒙古東部和南部、河北北部以及華北和東北的一些地區。其干燥花狀頭序為中藥旋覆花的一種藥材基源，具有降氣、消痰、行水、止咳等功效，收入2010版《中國藥典》。?

有研究表明，倍半萜內酯類化合物?I，化學名britanin，具有明顯的催吐、刺激鼻粘膜和祛痰活性和明顯的抑制霉菌（白色念珠菌、新型隱球菌、麯菌和石膏樣癬菌）的活性[錢名堃,?等.?線葉旋復花化學成分的研究.?化學學報，1983，41（3），254-261]，并具有明顯的抗原生動物（Entamoeba?histolytica和Trichomonas?vaginalis）的活性[Rubinchik,?M.?A.,?等.?Sesquiterpene?lactones?of?higher?plants?as?a?possible?source?of?new?antiprotozoal?drugs.?Rastitel'nye?Resursy,?1976,?12(2),?170-181.]。我們實驗室近期的藥理活性研究表明該倍半萜內酯還具有較強的抗體外腫瘤細胞（Hela細胞、HSC-T6細胞和B16細胞）的活性。上述研究表明該倍半萜內酯類化合物具有廣闊的藥用開發前景。?

發明內容

??本發明的目的是提供一種提取具有多種藥理活性倍半萜內酯類化合物I的方法。

我們在對中藥旋覆花進行系統研究中，發現該藥材原料歐亞旋覆花干燥頭狀花序中富含大量假愈創木烷型倍半萜類化合物，其中化合物I的含量可達浸膏的3.2%。我們對該化合物的提取純化工藝進行了研究，實現了快速、簡便、大量地提取純化化合物I，為進一步的藥理學研究和藥物開發奠定了基礎。?

此外，我們還考察了工藝條件，整個工藝適合于大量提取純化。??

一種以歐亞旋覆花干燥頭狀花序為原料，提取具有多種藥理活性的倍半萜內酯的方法，其特征在于采用有機溶劑提取、乙酸乙酯萃取、柱層析分離和重結晶手段，快速、簡捷、大量地提取純化化合物I；

在上述方法中，總浸膏提取時溶劑與原料的物料比在5:1到10:1范圍內，提取時如采用室溫下浸提，則浸提3次，每次7天；亦可采用加熱回流提取，提取3次，每次1小時；亦或采用超生提取其它現有技術進行提取；提取溶劑可選擇80-95%乙醇或甲醇或工業丙酮。

在上述方法中，萃取溶劑選用工業乙酸乙酯。?

在上述方法中，硅膠柱層析時選用的溶劑體系為石油醚與乙酸乙酯的體積比8:1至1:4，或石油醚與丙酮體積比10:1至1:2，梯度洗脫；通過薄層層析檢測，收集石油醚和乙酸乙酯展開體系下，Rf值約0.6，硫酸-乙醇顯紫色的組分，于低于60^oC條件下減壓濃縮。?

該方法具有成本低、操作簡便、轉化率較高、產品純度較高的特點。?

經上述各方法得到的化合物I粗品可通過以下步驟進行純化精制：通過一步硅膠柱層析分離純化，以石油醚與乙酸乙酯的體積比為2:1或石油醚與丙酮的體積比為3:1的溶劑洗脫，再經重結晶，用石油醚和丙酮混合溶劑體系，得到的產品晶型規則（無色塊晶）、熔點范圍窄（188~190^oC），純度可達95％以上（色譜測定）。?

本發明目標化合物提取純化率約為88.7%，實現了快速、簡捷、大量地提取純化該化合物，該方法具有操作簡便、成本低等優勢，且得到的產品純度高，適宜作為標準品及醫藥開發使用。?

附圖說明

圖1為倍半萜內酯類化合物?I結構式。?

圖2為化合物I的單晶X-射線衍射結構圖。

具體實施方式

以下通過實施例來進一步說明本發明，但本發明并不局限于此實施例。?

實施例1：化合物I的提取純化實驗

①?歐亞旋覆花干燥頭狀花序30g?，用300mL?95%乙醇室溫下提取3次，每次7天，濾出合并提取液，減壓濃縮得總浸膏約2.9g?。

②?將該浸膏加3.2g?柱層析硅膠拌樣，揮干溶劑后，用40g硅膠干法裝柱，上樣，以石油醚和乙酸乙酯體系（8:1-1:4，體積比）梯度洗脫。?