[發明專利]固定化原油降解菌的制備方法

無效

• 申請號: 201210550972.9
• 申請日: 2012-12-18
• 公開（公告）號: CN103074323A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發明（設計）人: 周莉英
• 申請（專利權）人: 陜西宣和通科技發展有限責任公司
• 主分類號: C12N11/14
• 分類號: C12N11/14;C12N11/10;C12N11/08;C12N11/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

?本發明涉及一種石油降解物質的制備方法。?

背景技術

?石油在生產、貯運、煉制加工及使用過程中，由于事故、不正常操作及檢修等原因，都會有石油烴類的溢出和排放，不可避免地造成石油廢棄物對土壤的污染。目前國內外的土壤修復技術主要分為物理方法、化學方法和生物處理法。生物修復技術包括游離的生物修復技術和固定化的生物修復技術。所謂固定化技術，是指利用物理或化學手段將游離的微生物或酶，定位于限定的空間區域并使其保持活性和可反復使用的一種基本技術。目前，固定化微生物技術廣泛應用于環境污染治理，主要的治理對象為難處理的有機廢水及重金屬污染的廢水，同時研究還涉及到大氣和土壤的污染治理。?

如何固定、選擇何種載體使固定化的細胞能較長時間保持強度和活度、降低成本，且能延長其使用壽命是固定化技術能否在工業生產中廣泛應用的關鍵。一般來說，固定化微生物的制備方法分為吸附法、包埋法、共價結合法和交聯法等4大類，其中吸附法與包埋法最為常用。包埋法是利用高聚物在形成凝膠時將細胞包埋在其內部，從而達到固定細胞的目的。有機高分子載體海藻酸鈉(SA)、聚乙烯醇(PVA)價格低廉，對細胞相對毒性小、傳質性能好，是應用最為廣泛的固定化微生物載體材料。無機載體如多孔陶珠、活性炭等，具有機械強度大、對微生物無毒性、不易被微生物分解、耐酸堿、成本低、壽命長等特性，因而是一類重要的載體材料。?

發明內容

本發明旨在提供一種微球狀固定化原油降解菌的制備方法。?

本發明所述的固定化原油降解菌的制備方法，包括：?

將PVA在80-100℃下完全溶解，制成10%的溶液，然后與1%的SA溶液混合均勻，再加入活性炭混勻，冷卻到40℃后，加入處于對數生長期的菌液，然后用注射器滴入含有3%?的CaCl₂的飽和硼酸溶液中，0-4℃下攪拌均勻，并保溫26小時，過濾出微球，并用生理鹽水洗滌即可。

優選地，菌液的加入量為20%。?

或者優選地，活性炭的加入量為50?g/L。?

本發明制備的固定化微球具有良好的機械強度、彈性和滲透性、較高的比表面積和孔容，致密的孔隙結構；固定化細菌的降解率比游離細菌的要高，球形的比片狀的固定化細菌對原油的降解率高；固定化細菌對pH值的適應性比游離菌更強，活化21?h處于穩定期的固定化微球的運行效果最好。?

具體實施方式

?實施例一。?

將10?g?PVA在80-100℃下完全溶解，制成10%的溶液，然后與100mL?1%的SA溶液混合均勻，再加入0.1?L活性炭混勻，冷卻到40℃后，加入20%處于對數生長期的菌液，然后用注射器滴入含有3%?的CaCl₂的飽和硼酸溶液中，0-4℃下攪拌均勻，并保溫26小時，過濾出微球，并用生理鹽水洗滌即可。?

經檢測，微球的彈性系數為98?N/m，滲透時間為35分鐘，破碎率為4.4%。?