[發(fā)明專利]含蛋白或多肽的疏水溶液、其制備方法及用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210550294.6
• 申請(qǐng)日: 2012-12-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103861090B
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-06-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬二利;鄭昌學(xué)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 美迪思生物科技（北京）有限公司
• 主分類號(hào): A61K38/28
• 分類號(hào): A61K38/28;A61K38/26;A61K38/49;A61K38/48;A61K38/00;A61K47/10;A61K47/20;A61K47/14;A61K47/24;A61K47/44;A61K8/64;A61K8/66;A61K8/86
• 代理公司: 中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所11038
• 代理人: 劉海羅

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥物學(xué)和制藥學(xué)領(lǐng)域，涉及含蛋白或多肽的疏水溶液、其制備方法及用途。

背景技術(shù)

一些有著重要應(yīng)用的蛋白質(zhì)多肽如胰蛋白酶、糜蛋白酶、胰島素、甲狀旁腺激素等，都是親水性的，其疏水化有著許多重要的應(yīng)用，例如：能夠提高親水物質(zhì)的穩(wěn)定性，能夠提高蛋白多肽類藥物的脂溶性，增加藥物穿越生物膜屏障的能力；能夠延長(zhǎng)蛋白或多肽藥物分子的作用時(shí)間，實(shí)現(xiàn)緩控釋給藥；對(duì)蛋白酶進(jìn)行疏水化固定，能夠極大地提高產(chǎn)率，并有利于產(chǎn)物的分離和蛋白酶的回收。

張海州等人通過(guò)油包醇體系，制備出了維生素C的非水溶液，能夠大大提高維生素C的穩(wěn)定性。但油包醇體系不穩(wěn)定，因此，張海州等人以鯨蠟基聚乙二醇/聚丙二醇-10/1二甲基硅氧烷（ABIL EM90，黏度400-2000cS）作乳化劑，制備出膏霜制劑，能夠避免油醇分離（張海州，等，用于穩(wěn)定化妝品中維生素C的油包多元醇體系的研究，2009《日用化學(xué)工業(yè)》39（4）：249-252；專利CN200810100726.7）。美國(guó)專利US2011/0147259A1通過(guò)加入高熔點(diǎn)的輔料三羥基硬脂酸（熔點(diǎn)110～140C）和12-羥基硬脂酸（熔點(diǎn)80C）以增加體系黏度（黏度值介于2，000cp－3，000，000cp），進(jìn)而增加油包醇的穩(wěn)定性。上述技術(shù)方案，均是通過(guò)增加黏度以克服不同密度的輔料分層，提高油包醇制劑的穩(wěn)定性，膏霜制劑或2，000cp－3，000，000cp的油包醇體系，本領(lǐng)域技術(shù)人員都熟知，這些體系并不是真正意義上的透明均勻的溶液，所用的乳化劑ABIL EM90，按產(chǎn)品說(shuō)明僅限于在化妝品中應(yīng)用，并不能藥用，并且12-羥基硬脂酸被美國(guó)FDA列為間接食品添加劑（用于食品容器和包裝材料），并不能直接做為藥物輔料使用。另外，CN200810100726.7中含有大量的多元醇（40－80wt%，），難以顯著的提高維生素C的脂溶性。

專利CN98126744.0和CN200910027809.2均是通過(guò)基因突變的方式，對(duì)蛋白酶進(jìn)行改造，生產(chǎn)出可以穩(wěn)定存在于非水介質(zhì)中的蛋白酶變異體。M．Hashimoto將棕櫚酸以共價(jià)結(jié)合的方式連接到胰島素分子上，發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)修飾后的胰島素，脂溶性及跨膜能力顯著增加（M．Hashimoto,etal.(1992)J.Pharm.Pharmacol.44:555-559）。但是，這些技術(shù)手段的共性是產(chǎn)業(yè)化成本高，并且伴有藥物結(jié)構(gòu)的改變，這有可能改變藥物分子的毒理、藥理。相對(duì)而言，通過(guò)制劑的手段，增加親水分子的脂溶性，具有安全高效的特點(diǎn)。

通過(guò)脂質(zhì)體技術(shù)，或形成藥物與磷脂等物質(zhì)的復(fù)合物，能夠?qū)⒂H水物質(zhì)包裹于疏水介質(zhì)中，從而提高藥物分子的脂溶性及穩(wěn)定性。相關(guān)研究請(qǐng)見(jiàn)JP Colletier,et al.(2002)BMC Biotechnol.2:9-16;CN1421246A，張磊，等，2009，《藥學(xué)與臨床研究》17：81-84；F.D.Cui,et a l.(2006)J CONTROL RELEASE.114:242－250;D.Y.Lee,et al.(2007)J CONTROL RELEASE.123:39-45。然而在這些研究中，蛋白質(zhì)、低分子量肝素等親水性物質(zhì)，并沒(méi)有真正溶解在疏水相中，并且整個(gè)體系也以固態(tài)呈現(xiàn)，而非是一種單相、穩(wěn)定、澄清的液體溶液。另外，就工藝流程而言，上述技術(shù)方案均需要通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、冷凍干燥等手段除去溶劑，因而增加了設(shè)備成本和生產(chǎn)成本。

專利US5719039獲得了一種含有蛋白酶的非水溶液，其是在合適的pH條件下，將含有蛋白酶的水溶液和含有Aerosol OT的異辛烷溶液混合，待形成蛋白酶與表面活性劑的離子復(fù)合物后，通過(guò)萃取的方法除去水相，溶解在有機(jī)相中的蛋白酶與表面活性劑離子復(fù)合物經(jīng)過(guò)干燥后，可以溶解在丙酮等有機(jī)溶劑中形成穩(wěn)定的單相溶液。但是在醫(yī)藥領(lǐng)域，有機(jī)溶劑有著嚴(yán)格的殘留量限制。

專利CN01115327.X所公開(kāi)的技術(shù)方案，系將含有胰島素的水溶液與雙親物質(zhì)混合，最終獲得含有胰島素的油相溶液。類似的AmaniElsayed將含有胰島素-殼聚糖復(fù)合物的水溶液，與雙親物質(zhì)混合，最終獲得含有胰島素的油相溶液。Amani Elsayed,et al.(2009)EUR.J.PHARM.BIOPHARM.73:269–279。由于以水相作為親水性物質(zhì)（如胰島素）的分散介質(zhì)，并且上述制劑并沒(méi)有去除水分的步驟，可見(jiàn)這些制劑并不屬于親水分子的疏水制劑，而是油包水（W/O）型乳劑。