[發明專利]一種誘導羅漢果組培塊莖的方法

無效

• 申請號: 201210548769.8
• 申請日: 2012-12-18
• 公開（公告）號: CN103004598A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 許鴻源
• 申請（專利權）人: 永福科源羅漢果有限責任公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 桂林市持衡專利商標事務所有限公司 45107
• 代理人: 唐智芳

技術領域

本發明涉及植物的組織培養技術，具體涉及一種誘導羅漢果組培塊莖的方法。

背景技術

羅漢果(Siraitia?grosvenori(Swingle)C.Jeffrey)是我國重要的特產中藥材，其果實為藥、食兼用果品，是僅次于甘蔗的第二大甜味劑原料，廣泛用于中成藥、保健食品、飲料、烹飪作料等的制作。因為羅漢果是雌雄異株，又花期不遇，加之花粉粘重且著生于花藥不易被昆蟲觸及的地方，所以很難像普通的風媒花或蟲媒花那樣傳粉，因此自然條件下，結果的機率極低(目前人工栽培仍然必須人工授粉)。同時，羅漢果種子實生苗有70％左右為雄株，且要等到2～3年之后，開花時才能判定，生產上基本無實用價值。但是，羅漢果的習性是，到了秋季分枝藤蔓會向下垂，并迅速伸長，一經著地就會膨大變作指頭大小的塊莖(俗稱“薯塊”、“薯仔”)，可以頑強地越冬，來年萌發成為獨立的新植株。這是羅漢果自然繁殖的重要方式。在人工栽培之后，演化成了人工壓蔓，小“塊莖”依然是羅漢果最重要的種源。然而，這些傳統塊莖容易傳播病毒及其它病蟲害，又難以大批量生產，無法滿足現代規模化種植的需求。

上世紀末無菌無毒的羅漢果組培苗研究成功，很快就取代傳統塊莖成為最重要的種源。但羅漢果組培苗在包裝運輸中容易損傷，尤其是遇到市場滯銷時，更需要占用大量場地和人工護理，而且難以長時間存貯。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種誘導羅漢果組培塊莖的方法。該方法簡單易操作，可實現大批量生產，培育得到的羅漢果組培塊莖無菌無毒，且便于運輸和長時間存貯，有很強的市場適應性。

本發明所述的誘導羅漢果組培塊莖的方法，包括以下步驟：

1)按常規方法獲得羅漢果脫毒組培苗；

2)切去脫毒組培苗上部頂芽和下部帶根節，取中間健壯部分，分切成帶腋芽單節莖段；

3)將分切得到的帶腋芽單節莖段微扦插于改良MS固體培養基中培養90～100天，即得到所述的羅漢果組培塊莖；其中，

所述的改良MS固體培養基配方為：MS+LFS?0.1～1.0mg·L^-1+SA?0.3～0.8mg·L^-1+蔗糖5～12％；

所述的培養條件為：溫度：晝/夜25/17(±2)℃；光照周期：晝/夜8～10h/16～14h；光照強度1200～1500lx。

上述方法中：

步驟3)中，所述的改良MS固體培養基配方優選為：MS+LFS?0.1～1.0mg·L^-1+SA?0.4～0.6mg·L^-1+蔗糖5～10％；進一步優選為：MS+LFS?0.3～0.8mg·L^-1+SA?0.5mg·L^-1+蔗糖8％；更優選為：MS+LFS?0.5mg·L^-1+SA0.5mg·L^-1+蔗糖8％。本申請所述的改良MS固體培養基的pH值與常規MS培養基的pH值相同，通常為5.8～6.0。上述配方中，蔗糖的濃度5～12％代表每升培養基中含有50～120g的蔗糖。配方中的LFS為靈發素(Lingfasu，代號PGR-08)，同時具有細胞分裂素和生長素兩類植物生長調節劑生物活性的特點；SA為撒酸(Salycylic?Acid)。

步驟3)中，所述的培養條件優選為：溫度：晝/夜25/17(±2)℃；光照周期：晝/夜8h/16h；光照強度1200～1500lx；其中光照強度進一步優選為1200～1300lx。更優選的培養條件為：溫度：晝/夜25/17(±2)℃；光照周期：晝/夜8h/16h；光照強度1200lx。

由本發明所述方法誘導形成的羅漢果組培塊莖是腋芽的直接膨大，實為短縮分枝，前尖后圓，形似玉米穗，只是體積比傳統塊莖小很多，如黃豆或花生米。而野生塊莖或人工壓蔓塊莖則是已經伸展開來的分枝藤蔓的觸地部分或被掩埋部分的膨大，兩端形態差異不顯著，體積較大，如手指般大小。