[發明專利]桑黃菌中吡喃酮的分離技術

無效

• 申請號: 201210546104.3
• 申請日: 2012-12-15
• 公開（公告）號: CN103044376A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發明（設計）人: 趙晨;宋愛榮;孫效樂;黃芳;梁大勇
• 申請（專利權）人: 青島農業大學
• 主分類號: C07D309/40
• 分類號: C07D309/40;A01G1/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.桑黃菌中吡喃酮的分離方法，其步驟順序如下：

(1)?制備桑黃粗提物；

(2)將步驟（1）所得的乙醇沉淀物與正相硅膠混勻攪拌，干燥后進行硅膠正相柱層析，用洗脫劑洗脫2-5次，得到洗脫液；

(3)將步驟（2）中得到的最后一次洗脫液減壓蒸干，等體積硅膠拌樣，進行正相硅膠層析，用洗脫劑洗脫；

(4)收集上述步驟（3）得到的洗脫液，減壓濃縮，使用氯仿：甲醇=1:1溶解，甲醇凝膠柱層析，用洗脫劑洗脫，使用TLC檢測收集的洗脫液，適當合并洗脫液，減壓干燥；

(5)將步驟（4）中得到的產物使用甲醇或者丙酮溶解；

(6)將步驟（5）中得到的溶液進行重結晶操作，結晶即為吡喃酮。

2.如權利要求1所述的一種從桑黃菌中分離苯乙醇的方法，其特征在于所述桑黃粗提物，由下述方法制得：

(1)發酵培養基配方以克/100毫升計是：

玉米淀粉????1-5%?????????????葡萄糖??????1-5%

蛋白胨?????0.1-0.5%??????????酵母膏?????0.1-0.5%

硫酸鎂?????0.1-0.5%??????????磷酸二氫鉀?0.01-0.05%

(2)如權利要求1所述桑黃粗提物的發酵培養方法是，將桑黃菌種以常規方法接種到裝有液體培養基的三角燒瓶內，以20～35℃溫度，搖瓶轉速為80～280r/min，pH?3～8條件下，震動培養7～15天；培養中當pH值降到2.5～4時，將搖瓶中的種子接種到50L發酵罐的培養液中，以溫度20～35℃，發酵罐壓力0.1～0.2公斤/平方厘米，pH?3～8，通氣量0.5～1.1vvm，攪拌速度100～280轉/分的條件，培養7～15天，即可利用桑黃菌絲體發酵全液制備桑黃粗提物；

(3)取步驟(2)中所得桑黃菌絲體發酵全液，將其以常規方式減壓濃縮，使其體積濃縮到原體積的1/2～1/5；

(4)用體積百分比為60～95%的乙醇對上述步驟(3)濃縮后的發酵液進行提取，其中，加入乙醇的量是濃縮液體積的2～5倍，能夠使提取液中乙醇濃度達到60～90%；

(5)對步驟(4)所得提取液在50～70℃條件下，加熱1～2小時；以常規方法進行分離，并通過二級過濾除去雜質，分離獲得乙醇提取液；將上述乙醇提取液以常規方式減壓濃縮，使其體積濃縮到原體積的1/5～1/10；

(6)將將步驟(5)所得的濃縮液以低溫冷凍干燥的方法進行干燥，得桑黃粗提物。

3.如權利要求1所述的桑黃菌中吡喃酮的分離技術，其特征在于所述的吡喃酮為2-甲基-3?-?羥基-4?-吡喃酮。

4.如權利要求1所述的桑黃菌中吡喃酮的分離技術，其特征在于，步驟(2)中所述的拌樣硅膠為100-200目正相硅膠。

5.如權利要求1所述的桑黃菌中吡喃酮的分離技術，其特征在于，步驟(2)中所述的層析硅膠為正相200-300目，洗脫劑為氯仿和/或甲醇。

6.如權利要求1所述的桑黃菌中吡喃酮的分離技術，其特征在于，步驟(3)中所述的硅膠用量為等體積，洗脫劑為石油醚：丙酮=20:1-40:1。

7.如權利要求1所述的桑黃菌中吡喃酮的分離技術，其特征在于，步驟(4)中所述的凝膠為Sephadex?LH-20，洗脫劑為氯仿：甲醇=1:1。

8.如權利要求1所述的桑黃菌中吡喃酮的分離技術，其特征在于，步驟(5)所述溶解劑為甲醇。

9.如權利要求1所述的桑黃菌中吡喃酮的分離技術，其特征在于，步驟(6)所述的操作為重結晶，次數為3-4次。