[發(fā)明專利]人二倍體狂犬病疫苗病毒液的滅活方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210546062.3
• 申請日: 2012-12-14
• 公開（公告）號: CN103013933A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 左靜;高正倫;劉海文;方群;季振濤;鄭森遠(yuǎn);張騫;劉勇;張芮銘;代凡;吳淞;張雪;戴會忠;劉雅靜;王云達(dá);樊鵬
• 申請（專利權(quán)）人: 北京民海生物科技有限公司
• 主分類號: C12N7/06
• 分類號: C12N7/06
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;張慶敏

1.一種人二倍體狂犬病疫苗病毒液的滅活方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）濃縮人二倍體狂犬病疫苗病毒液，濃縮倍數(shù)為10～20倍，獲得病毒濃縮液；

（2）添加滅活劑β-丙內(nèi)酯，攪拌；

（3）滅活病毒液的轉(zhuǎn)移；包括兩次滅活病毒液的轉(zhuǎn)移，第1次是將添加了滅活劑并攪拌后的病毒液轉(zhuǎn)移至另一容器，第2次是將第1次轉(zhuǎn)移后的滅活病毒液繼續(xù)攪拌滅活，然后再轉(zhuǎn)移到無毒區(qū)的容器中；

（4）水解去除滅活劑。

2.如權(quán)利要求1所述的滅活方法，其特征在于，步驟（1）濃縮病毒液的方法是將狂犬病病毒液先后經(jīng)3～6μm的過濾器和0.8μm的過濾器過濾，然后進(jìn)行超濾濃縮。

3.如權(quán)利要求2所述的滅活方法，其特征在于，所述的超濾濃縮是采用10KB的超濾膜包進(jìn)行超濾。

4.如權(quán)利要求2所述的滅活方法，其特征在于，還包括將超濾濃縮后的濃縮液先后經(jīng)3～6μm的過濾器和0.45μm的過濾器過濾。

5.如權(quán)利要求1～4任一所述的滅活方法，其特征在于，步驟（1）獲得的濃縮病毒液中人血白蛋白的濃度為40-60mg/ml，濃縮液的pH值為7.0～9.0，10-15℃下平衡。

6.如權(quán)利要求1所述的滅活方法，其特征在于，步驟（2）添加添加滅活劑β-丙內(nèi)酯的方法是：先將β-丙內(nèi)酯用滅菌水1：40倍稀釋，再以體積比1:100添加到濃縮病毒液中。

7.如權(quán)利要求1所述的滅活方法，其特征在于，步驟（2）攪拌條件為10～15℃下，155～180r/min。

8.如權(quán)利要求1所述的滅活方法，其特征在于，步驟（3）中在滅活劑添加后的第50～70min時，進(jìn)行第1次滅活病毒液的轉(zhuǎn)移；病毒液轉(zhuǎn)移入另一容器后繼續(xù)攪拌，待添加滅活劑后的第600min～700min時，將滅活液轉(zhuǎn)移到無毒區(qū)的容器中繼續(xù)攪拌滅活至滅活劑添加后的第1400～1500min。

9.如權(quán)利要求1所述的滅活方法，其特征在于，步驟（3）的操作在10～15℃條件下進(jìn)行。

10.如權(quán)利要求1所述的滅活方法，其特征在于，將步驟（3）獲得的滅活液于37℃進(jìn)行水解140～160min。