[發明專利]TNF基因突變檢測特異性引物和液相芯片

有效

• 申請號: 201210545880.1
• 申請日: 2012-12-14
• 公開（公告）號: CN103865989A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 劉麗;許昌有
• 申請（專利權）人: 益善生物技術股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 萬志香;秦雪梅

1.一種TNF基因突變檢測液相芯片，其特征是，包括有：

（A）.針對TNF基因不同突變位點分別設計的野生型和突變型的ASPE引物對：每條ASPE引物由5’端的tag序列和3’端針對目的基因突變位點的特異性引物序列組成，所述特異性引物序列為：針對G8226A位點的SEQ?ID?NO.15及SEQ?ID?NO.16，針對G-308A位點的SEQ?ID?NO.17及SEQ?ID?NO.18，針對A1031G位點的SEQ?ID?NO.19及SEQ?ID?NO.20，針對G863T位點的SEQ?IDNO.21及SEQ?ID?NO.22，針對G857A位點的SEQ?ID?NO.23及SEQ?ID?NO.24，針對G8146C位點的SEQ?ID?NO.25及SEQ?ID?NO.26，和/或針對C5478T位點的SEQ?ID?NO.27及SEQ?ID?NO.28；所述tag序列選自SEQ?ID?NO.1～SEQ?ID?NO.14；

（B）.有不同anti-tag序列包被的、具有不同顏色編碼的微球，所述anti-tag序列與微球連接中間還設有間隔臂序列；所述anti-tag序列選自SEQ?ID?NO.29～SEQ?ID?NO.42，且所述anti-tag序列能相應地與（A）中所選的tag序列互補配對；

（C）.用于擴增出需要檢測的、具有相應突變位點的目標序列的引物。

2.根據權利要求1所述的TNF基因突變檢測液相芯片，其特征是，所述擴增引物為針對G8226A、G-308A位點的SEQ?ID?NO.43及SEQ?ID?NO.44，針對A1031G、G863T、G857A位點的SEQ?ID?NO.45及SEQ?ID?NO.46，針對G8146C位點的SEQ?ID?NO.47及SEQ?ID?NO.48，和/或針對C5478T位點的SEQ?ID?NO.49及SEQ?ID?NO.50。

3.根據權利要求1或2所述的TNF基因突變檢測液相芯片，其特征是，所述ASPE引物為：針對G8226A位點的由SEQ?ID?NO.1和SEQ?ID?NO.15組成的序列及由SEQ?ID?NO.2和SEQ?ID?NO.16組成的序列，針對G-308A位點的由SEQ?ID?NO.3和SEQ?ID?NO.17組成的序列及由SEQ?ID?NO.4和SEQ?ID?NO.18組成的序列，針對A1031G位點的由SEQ?ID?NO.5和SEQ?ID?NO.19組成的序列及由SEQ?ID?NO.6和SEQ?ID?NO.20組成的序列，針對G863T位點的由SEQ?ID?NO.7和SEQ?ID?NO.21組成的序列及由SEQ?ID?NO.8和SEQ?ID?NO.22組成的序列，針對G857A位點的由SEQ?ID?NO.9和SEQ?ID?NO.23組成的序列及由SEQ?ID?NO.10和SEQ?ID?NO.24組成的序列，針對G8146C位點的由SEQ?ID?NO.11和SEQ?ID?NO.25組成的序列及由SEQ?ID?NO.12和SEQ?ID?NO.26組成的序列，和/或針對C5478T位點的由SEQ?ID?NO.13和SEQ?ID?NO.27組成的序列及由SEQ?ID?NO.14和SEQ?ID?NO.28組成的序列。

4.根據權利要求1或2所述的TNF基因突變檢測液相芯片，其特征是，所述間隔臂為5－10個T。

5.用于TNF基因突變檢測的特異性引物，其特征是，特異性引物為針對G8226A位點的SEQ?ID?NO.15及SEQ?ID?NO.16，針對G-308A位點的SEQ?ID?NO.17及SEQ?ID?NO.18，針對A1031G位點的SEQ?ID?NO.19及SEQ?ID?NO.20，針對G863T位點的SEQ?ID?NO.21及SEQ?ID?NO.22，針對G857A位點的SEQ?ID?NO.23及SEQ?ID?NO.24，針對G8146C位點的SEQ?ID?NO.25及SEQ?IDNO.26，和/或針對C5478T位點的SEQ?ID?NO.27及SEQ?ID?NO.28。