[發明專利]一種利用海洋膠原蛋白酶MCP-01制備膠原蛋白小肽的方法有效
| 申請號： | 201210540438.X | 申請日： | 2012-12-13 |
| 公開（公告）號： | CN102994601A | 公開（公告）日： | 2013-03-27 |
| 發明（設計）人： | 張玉忠;冉麗媛;王磊;劉德華;陳秀蘭;宋曉妍;秦啟龍;蘇海楠;周百成 | 申請（專利權）人： | 山東大學 |
| 主分類號： | C12P21/06 | 分類號： | C12P21/06 |
| 代理公司： | 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219 | 代理人： | 王緒銀 |
| 地址： | 250012 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 利用 海洋 膠原 蛋白酶 mcp 01 制備 蛋白 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種利用海洋膠原蛋白酶MCP-01制備膠原蛋白小肽的方法，其特征在于，包括如下步驟：
（1）將海洋膠原蛋白酶MCP-01溶于Tris-HCl緩沖液中，配成酶濃度為0.3～0.5mg/mL的酶液；
（2）按照重量體積比為18～22:1的比例將牛肌腱I型不可溶膠原蛋白加入酶液中，單位mg/ml，在45～50℃的水浴鍋中反應24～26小時，在4℃條件下，13000轉/分鐘離心10～15min，制得膠原蛋白肽；
（3）上述膠原蛋白肽經過截留量為3000Da的超濾管超濾離心，收集下層濾過物，即制得膠原蛋白小肽。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（1）中，Tris-HCl緩沖液濃度為50mM，pH9.0。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（1）中，酶液中酶濃度為0.4mg/mL。
4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（2）中，牛肌腱I型不可溶膠原蛋白與酶液的重量體積比為20:1。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（2）中，反應條件為50℃的水浴鍋中反應24小時。
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