[發明專利]一種高產3-甲硫基丙醇的釀酒酵母基因工程菌及其制備方法與應用有效
| 申請號： | 201210539139.4 | 申請日： | 2012-12-14 |
| 公開（公告）號： | CN103409331A | 公開（公告）日： | 2013-11-27 |
| 發明（設計）人： | 王成濤;劉國榮;張嬋;楊雪蓮;孫寶國;趙磊;張佳嬋 | 申請（專利權）人： | 北京工商大學 |
| 主分類號： | C12N1/19 | 分類號： | C12N1/19;C12N15/54;C12N15/60;C12N15/81;C12N15/09;C12P11/00;C12R1/865 |
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| 地址： | 100048*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 高產 甲硫基 丙醇 釀酒 酵母 基因工程 及其 制備 方法 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種高產3-甲硫基丙醇的釀酒酵母基因工程菌，其特征是將釀酒酵母(Saccharomyces?cerevisiae)的氨基轉移酶基因(ARO9基因)、脫羧酶基因(ARO10基因)耦合過量表達及甲硫基裂解酶基因(CYS3基因)敲除，構建釀酒酵母基因工程菌，選育的工程菌經多次傳代，遺傳穩定，3-甲硫基丙醇的代謝通量和產量明顯提高。
2.一種高產3-甲硫基丙醇的釀酒酵母基因工程菌制備方法，其特征是設計適當引物，克隆出Saccharomyces?cerevisiae的氨基轉移酶基因(ARO9基因)、脫羧酶基因(ARO10基因)、甲硫基裂解酶基因(CYS3基因)，并將ARO9基因、ARO10基因耦合連接到穿梭質粒，獲得重組質粒，并將重組質粒導入Saccharomyces?cerevisiae，篩選出陽性轉化子；通過同源重組的方法，將CYS3與標記基因融合拼接的DNA片段再整合到陽性轉化子基因組中，獲得工程菌。
3.一種高產3-甲硫基丙醇的釀酒酵母基因工程菌應用，其特征以蛋氨酸為主要原料，工程菌在發酵罐中高效利用蛋氨酸，轉化生成3-甲硫基丙醇香料，制備天然3-甲硫基丙醇香料。
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