[發明專利]穿刺活檢組織芯片

有效

• 申請號: 201210538814.1
• 申請日: 2012-12-13
• 公開（公告）號: CN103869057A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 郜恒駿;張可浩;張新;盛海輝;顏虹;張宇
• 申請（專利權）人: 泰州醫藥城博奧邦科生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/48
• 分類號: G01N33/48
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種穿刺活檢組織芯片的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

第一步，病理診斷：乳腺穿刺活檢組織條經過常規病理固定、脫水包埋、石蠟切片染色后，進行病理診斷。

第二步，標本挑選：選擇42例乳腺穿刺活檢病理診斷確診為乳腺癌的石蠟組織切片，標記HE染色切片上乳腺癌病灶的區域（>1mm）作為組織芯片制備的目標組織條。

第三步，石蠟芯制備：以HE染色切片上乳腺癌病灶的區域的標記為指引，用石蠟切片刀將相應的石蠟組織塊中的穿刺組織條切斷，切取組織條長度為1mm-4mm。將石蠟組織塊放于70℃預熱的金屬加熱盤上（石蠟塊切片面朝下），加熱石蠟組織塊切片面約1分鐘，至石蠟組織塊淺表石蠟部分融化，用鑷子小心取下乳腺癌病灶目標石蠟組織條。將目標石蠟組織條放于金屬加熱盤上繼續加熱至組織條石蠟完全融化。小心將融化的石蠟組織條縱向放入自制的直徑為1.5mm的塑料小管中（70℃預熱）。將裝有目標石蠟組織條的塑料小管整體水平放入少量融化的石蠟中，以便塑料小管內浸滿石蠟。將塑料小管取出置于4℃冷臺上快速冷卻。肉眼對光觀察可清晰看見塑料小管內組織條所在的位置，并用記號筆標記組織條兩端的位置。用石蠟切片刀在組織條兩端標記處切斷塑料小管，小心縱向切開塑料小管（注意盡量不要切到組織條），取出石蠟組織條，即為：石蠟芯。

第四步，受體蠟模：制備空白石蠟塊，利用組織芯片制備儀定位鉆取孔徑為1.5mm的空心受體蠟模，如附圖1。

第五步，組織陣列：依照乳腺癌穿刺活檢組織的石蠟組織芯片的設計，將總共42例石蠟芯逐一安放到空心受體蠟模中相應的空白孔位點，以陣列表面齊平為基準，如附圖2。

第六步，陣列融合：將組織陣列置于干燥箱中，調節干燥箱溫度與時間，確保所有組織石蠟芯與受體蠟模充分融合且石蠟芯不移位變形。

第七步，石蠟切片：利用石蠟切片機切片制作石蠟切片，片厚4um。將石蠟切片平鋪與粘附載玻片上，如附圖3。在載玻片標記區域作好標記。

第八步，乳腺癌穿刺活檢組織的石蠟組織芯片芯片制作完畢。結合免疫組化、分子原位雜交等實驗分子研究技術，所制備的乳腺癌穿刺活檢組織的石蠟組織芯片可用于乳腺癌的分子醫學研究。

2.根據權利要求1所述的一種穿刺活檢組織芯片的制備方法，其特征在于：所述穿刺活檢組織芯片包含但不限于乳腺癌穿刺活檢組織標本，也可以是其他惡性腫瘤的穿刺活檢組織標本，或者良性腫瘤以及非腫瘤的穿刺活檢組織標本。

3.根據權利要求1所述的一種穿刺活檢組織芯片的制備方法，其特征在于：臨床穿刺活檢石蠟組織中目標組織的獲取方式與操作程序為：先將目標組織在相應的HE染色石蠟切片上病理診斷定位、定位切斷目標組織條，然后加熱融化獲取目標組織條，并將目標組織條放入內徑相當的塑料小管中冷卻塑性，制備石蠟芯柱。

4.根據權利要求1所述的一種穿刺活檢組織芯片的制備方法，其特征在于：穿刺活檢組織芯片組織點直徑為1.5mm、但不限于1.5mm，可以是1.0mm-2.0mm之間；組織芯片點的間距為1mm。?