[發明專利]枯草芽孢桿菌DS3在降解皂素廢水有機污染物中的應用

有效

• 申請號: 201210538229.1
• 申請日: 2012-12-13
• 公開（公告）號: CN103011424A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 鄭丹;鮑建國
• 申請（專利權）人: 中國地質大學（武漢）
• 主分類號: C02F3/34
• 分類號: C02F3/34;C02F101/30
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102
• 代理人: 唐萬榮;鄔麗明

技術領域

本發明屬于生物技術領域，尤其涉及一種枯草芽孢桿菌（Bacillus?Subtilis）DS3在降解皂素廢水有機污染物中的應用。

背景技術

皂素（如薯蕷皂素）生產廢水具有廢水量小、色度大、有機物濃度高、酸度大、溫度高等特點，可生化性差，是一種非常難處理的廢水。

根據《皂素工業水污染物排放標準》（GB20425-2006）中具體規定，自2009年起COD排放量應低于300mg/L。目前皂素水解原液COD濃度達到20000-40000mg/L，綜合廢水COD濃度約為4000-12000mg/L。若直接排入水體，會導致水體的有機污染物濃度大幅度增加，由此引起江河湖泊嚴重污染，不僅直接影響了人們的生存環境，也造成了國民經濟的巨大損失。

皂素廢水中含有大量有機污染物，其中部分毒性醛、酮、酚類物質對污水處理系統里污泥中的微生物具有抑制作用，一般微生物不能正常生長。

同時，皂素廢水中硫酸根濃度高，約為8000mg/L左右，在高鹽度廢水的生物處理系統中，由于鹽度的變化往往會破壞微生物的細胞膜和菌體內的酶，致使污泥活性下降。同時，微生物對環境具有一定的適應能力，在一定鹽度范圍內微生物通過自身的滲透調節機制平衡細胞內的滲透壓或保護細胞內的原生質，調節自身新陳代謝以適用鹽度的變化。活性污泥在含鹽環境中經過一段時間馴化后，將具有一定的耐鹽性。

目前對皂素廢水的處理多采用物理或化學的方法，現有技術中還沒有微生物降解方法和用于降解皂素廢水有機污染物的菌株的報導。

發明內容

本發明要解決的技術問題是：提供一種枯草芽孢桿菌DS3在降解皂素廢水有機污染物中的應用。

本發明為解決上述技術問題所采取的技術方案為：

枯草芽孢桿菌DS3在降解皂素廢水有機污染物中的應用。

上述方案中，挑取活化后的枯草芽孢桿菌DS3單菌落，于LB液體培養基中培養過夜，按培養后的枯草芽孢桿菌DS3：皂素廢水的體積比為0.5-2：100接種，30-35℃、pH值為6-8的條件下恒溫培養，反應48-72小時。

上述方案中，所述枯草芽孢桿菌DS3保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏號為CCTCC?M?2010146。

與現有技術相比，本發明取得的有益效果是：枯草芽孢桿菌DS3在高濃度硫酸根離子環境中具有較強的生長能力和良好的去除皂素廢水中有機污染物的能力，該菌株能在72小時之內去除皂素廢水中的COD?2150mg/L，去除效率達到50.71%。本發明為降解皂素廢水高濃度有機污染物提供了有用的菌源，拓寬了對枯草芽孢桿菌功能方面的應用，具有較強的應用價值。

附圖說明

圖1為枯草芽孢桿菌DS3的PCR產物瓊脂糖電泳圖（左為Marker；右為擴增產物）。

具體實施方式

下面結合附圖和實施例對本發明作進一步的描述，當然下述實施例不應理解為對本發明的限制。

一、枯草芽孢桿菌DS3的篩選：

（一）、材料準備：

1、實驗廢水和池底污泥取自湖北省十堰市某黃姜皂素生產廠生產排放廢水的生化處理系統。

2、培養基：

篩選培養基：3g/L牛肉膏，10g/L蛋白胨，5g/L氯化鈉，20g/L瓊脂，pH6.8。

富集培養基（g/L）：30g/L?磷酸氫二鉀，100mg/L無水硫酸鎂，10g/L磷酸二氫鉀，10mg/L四水硫酸錳，5g/L硝酸銨，10mg/L七水硫酸亞鐵，1g/L硫酸鈉，5mg/L氯化鈣，冰箱保存。使用時，稀釋10倍，加入10%葡萄糖，pH值7.0～7.2。

LB液體培養基：蛋白胨?10.0g/L，酵母提取物5.0g/L，氯化鈉?10.0g/L，蒸餾水1000mL，pH7.0。

LB固體培養基：蛋白胨?10.0g/L，酵母提取物5.0g/L，氯化鈉10.0g/L，蒸餾水1000mL，瓊脂15g/L（固），?pH7.0。

LB斜面培養基：蛋白胨?10.0g/L，酵母提取物5.0g/L，氯化鈉10.0g/L，蒸餾水1000mL，瓊脂20g/L（固），pH7.0。

3、實驗儀器和設備：

國華SHA-B恒溫振蕩器，

東器SPX生化培養箱，

立式壓力蒸汽滅菌器，

光學顯微鏡-----Olympus有限公司，

pH計等-----?sarporiusPD-10，

超凈工作臺，

PTC200型PCR儀，

電泳儀及電泳槽，