[發明專利]山楂核中總木脂素的制備方法及新用途

無效

• 申請號: 201210538080.7
• 申請日: 2012-12-13
• 公開（公告）號: CN102988525A
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發明（設計）人: 宋少江;黃肖霄;彭纓;李玲芝;周晨晨
• 申請（專利權）人: 沈陽藥科大學
• 主分類號: A61K36/734
• 分類號: A61K36/734;A61P35/00
• 代理公司: 沈陽杰克知識產權代理有限公司 21207
• 代理人: 李宇彤

技術領域

本發明涉及植物醫藥技術領域，尤其涉及植物山楂核中總木脂素的制備方法及在制備抗腫瘤藥物中的新應用。

背景技術

惡性腫瘤是危害人類健康和生命的主要疾病。據估計全世界每年約有500萬人死于惡性腫瘤，是繼心血管疾病之后的第二大致死病因。因此，全球每年投入大量的人力物力用于研究和開發防治癌癥的新藥物。近年來，藥物學專家除了研究西藥外，也對中藥進行了深入的研究，迄今為止至少評估了4萬余種高等植物的抗腫瘤活性。據國外資料介紹，全世界已經開發了幾百種抗癌新藥，其中很多屬于天然植物提取物。

山楂?(Crataegus)為薔薇科?(Rosaceae)山楂屬植物，落葉稀半常綠灌木或小喬木，全世界大約有280種，也有文獻報道在1000種以上。主要分布于北溫帶大約在北緯30度到50度之間的東亞、歐洲和北美洲等地，據中國植物志記載山楂在我國約有?17種，2變種，其中山里紅?Crataegus?pinnatifida?Bge?var.?Major?N.?E.?Br.山楂?Crataegus?pinnatif??Bge.及野山楂?Crataegus?cuneata?Sieb.&?Zucc.最為常見。山楂性溫?，味酸、甘微溫，歸脾、胃、肝經，具有消食化積、活血化瘀的功效，臨床主要用于食滯不化及產后瘀阻腹痛，以及高血壓、冠心病、高血脂的治療。郭法長[郭法長，焦風云，張茂林等.山楂抗癌有效成分的研究[J].河南醫科大學學報.1992，27（4）：312-314.]等研究證實山楂中提取的多酚類化合物是較強的抗癌有效成分，可以消除亞硝酸鹽，其消除率為86.4%，能抑制人淋巴細胞程序外DNA損傷，其抑制率為71.5%，可以使接種艾氏腹水癌的昆明小鼠的生命延長18d，其生命延長率為180%。但在本發明前，還未有見到山楂核有效部位抗腫瘤活性的報道。

山楂核的化學成分與山楂果實、葉有較大區別，主要成分有簡單苯丙素類、木脂素類、倍半木脂素等。其中含量較大的化合物如下所示：

有文獻報道該類型化合物具有較強的抑制腫瘤細胞活性，同時由于山楂屬于藥食同源類植物，無毒、副作用。從其中開發出來的抗腫瘤藥物具有低毒高效的特點，有十分寬廣的市場前景。

發明內容

本發明的目的之一是提供一種植物山楂核的總木脂素的制備方法，該方法是將取山楂核原料粉碎成粗粉，用甲醇或乙醇提取，減壓濃縮得到粗提物后用水混懸，再上大孔樹脂以水醇系統洗脫得到總木脂素。該方法采用大孔樹脂層析一步即可獲得有效部位，該方法具有操作簡單、成本較低、獲得的總木脂素純度高的優點。具體通過以下步驟實現：

1.?取山楂核原料粉碎成粗粉，用5~10倍體積量的甲醇或乙醇提取2~4次，甲醇或乙醇的體積濃度為50%~100%，提取采用加熱回流或超聲提取；

2.?將提取液合并后減壓濃縮，除去甲醇或乙醇，減壓濃縮干燥既得浸膏，得率約為2%~5%；

3.?浸膏加水混懸后，上大孔樹脂，10%~20%乙醇-水系統洗脫2~6個柱體積后再用體積濃度30%~50%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，噴霧干燥得到干燥粉末，總得率約為2%~5%。采用的大孔樹脂為DM301、NKA-9、AB-8、D101、DM130、DM-18、D312型弱極性或中極性大孔樹脂。所得的總木脂素利用FeCl₃顏色反應呈陽性，且HCl-Mg反應呈陰性，排除了黃酮類化合物的影響，利用HPLC分析，色譜圖中的最大色譜峰為(+)-balanophonin，確定所得提取物為總木脂素。利用可見分光光度法，以(+)-balanophonin?（自制，純度97%）為對照品，0.6%FeCl₃-0.9%K₃[Fe(CN)₆]?(1:0.9)混合溶液為顯色劑，檢測波長720nm，檢測結果顯示所得提取物總木脂素含量在60%~90%。

本發明的目的之二是提供山楂核中總木脂素在制備抗腫瘤藥物中的新用途。所述的植物山楂核中總木脂素加入藥劑學允許的賦型制劑制備成藥物制劑，制劑形式為口服制劑，所述口服制劑包括片劑、膠囊劑、丸劑或顆粒劑。