[發明專利]精子芯片無效
| 申請號： | 201210533770.3 | 申請日： | 2012-12-12 |
| 公開（公告）號： | CN103866402A | 公開（公告）日： | 2014-06-18 |
| 發明（設計）人： | 郜恒駿;張可浩;張新;朱華玉;張明飛;馬小慧;顏虹 | 申請（專利權）人： | 泰州醫藥城博奧邦科生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C40B50/06 | 分類號： | C40B50/06 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 225300 江蘇省*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 精子 芯片 | ||
1.一種精子芯片的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：
第一步，精液收集。收集已婚已育男性自愿捐精者以及男性不孕（排除輸精管阻塞等非精子缺陷因素）患者自愿捐精的精液約1ml。
第二步，精子固定。待精液自然液化后加入10倍精液體積的精子固定溶液，充分混勻，室溫固定1小時。
第三步，脫水包埋。離心收集精子，中性PBS緩沖液洗滌精子2次。酒精梯度脫水后，脫脂透明，離心收集處理好的精子。將精子加入50ul預熱融化的石蠟中，混勻。冷卻固定成精子石蠟塊。
第四步，精子蠟芯。利用組織芯片制備儀石蠟芯取樣器，鉆取直徑為1mm的精子蠟芯。
第五步，受體蠟模。制備空白石蠟塊，利用組織芯片制備儀定位鉆取孔徑為1mm的空心受體蠟模，小陣列內孔間距為1mm。
第六步，精子陣列。依照精子芯片的設計，將精子石蠟芯逐一安放到空心受體蠟模中相應的空白孔位點，以陣列表面齊平為基準。
第七步，陣列融合。將精子陣列置于干燥箱中，調節干燥箱溫度與時間，確保所有精子石蠟芯與受體蠟模充分融合且精子石蠟芯不移位變形。
第八步，石蠟切片。利用石蠟切片機切片制作石蠟切片，片厚4um。將石蠟切片平鋪與粘附載玻片上。在載玻片標記區域作好標記。
2.根據權利要求1所述的一種人類精子芯片的制備方法，其特征在于：所述精子芯片包含已婚已育男性自愿捐精者以及男性不孕（排除輸精管阻塞等非精子缺陷因素）患者自愿捐精的精子。
3.根據權利要求1所述的一種人類精子芯片的制備方法，其特征在于：精子經過脫水包埋處理后，直接用于精子石蠟芯的制備。
4.根據權利要求1所述的一種人類精子芯片的制備方法，其特征在于：精子芯片為矩形陣列組成，精子石蠟芯片點直徑為（但不限于）1mm，也可為1.5mm、或2mm等不同規格，精子石蠟芯片點間距為（但不限于）1mm。
5.根據權利要求1所述的一種人類精子芯片的制備方法，其特征在于：以已婚已育男性自愿捐精者的精子作為陽性對照，同時也可作為該張精子芯片的定位判斷點。?
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