[發明專利]一種polyoxinK高產菌株的構建方法無效

申請號：	201210533704.6	申請日：	2012-12-11
公開（公告）號：	CN103114103A	公開（公告）日：	2013-05-22
發明（設計）人：	陳文青;鄧子新;秦娜娜;周佳海	申請（專利權）人：	武漢大學
主分類號：	C12N15/76	分類號：	C12N15/76;C12N1/21;C12R1/465
代理公司：	武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222	代理人：	汪俊鋒
地址：	430072 湖***	國省代碼：	湖北;42
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種 polyoxink 高產菌株構建方法
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【權利要求書】：

1.一種polyoxinK高產菌株的構建方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）工業菌株的polB突變株CXR1的構建及篩選

將polB的中斷載體pJTU4720,通過轉化導入ET12567/Puz8002的感受態中；挑取單菌落接入指形瓶中8-10h后按照1：10的比例轉接到LB內37℃搖3小時；進行通過接合轉移的方式轉到金產色鏈霉菌工業菌株中，接合子經過抗性驗證及PCR復證正確后，經放松培養，梯度稀釋，在阿泊拉霉素和硫鏈絲菌素平板上驗證，證明挑取的候選突變株為預期的polB中斷突變株；

2）突變株的發酵

調節發酵液pH值至3.0，將突變株直接進行發酵。

2.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，用草酸調節發酵液pH值至3.0。

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