[發(fā)明專利]人源抗人血管內(nèi)皮細胞生長因子抗體及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210533178.3
• 申請日: 2012-12-11
• 公開（公告）號: CN103012589A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 孫志偉;王雙;曾大地;常紅艷;張暢;仇瑋祎;孫九如;范志和;楊濤;范鐵炯
• 申請（專利權(quán)）人: 上海賽倫生物技術(shù)有限公司;中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所
• 主分類號: C07K16/22
• 分類號: C07K16/22;C12N15/13;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/19;C12N5/10;A61K39/395;A61P35/00;G01N33/68;C12N15/85;C07K19/00
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;張慶敏

1.一種人源抗VEGF抗體，其特征在于，其輕鏈CDR3的氨基酸序列含有如SEQID?NO.3~9中的任意一條氨基酸序列。

2.如權(quán)利要求1所述的抗體，其特征在于，其輕鏈CDR1、CDR2分別含有如SEQID?NO.1和SEQ?ID?NO.2所示的氨基酸序列，其重鏈CDR1、CDR2和CDR3分別含有如SEQ?ID?NO.10、SEQ?ID?NO.11和SEQ?ID?NO.12所示的氨基酸序列。

3.如權(quán)利要求1所述的抗體，其特征在于，其輕鏈CDR1氨基酸序列為RASQSVSSSYLA，其輕鏈CDR2氨基酸序列為GASSRAT，其輕鏈CDR3氨基酸序列為SEQ?ID?NO.3~9中的任意一條；其重鏈CDR1氨基酸序列為SYAMS，重鏈CDR2氨基酸序列為AITGTGGETYYTDSVKG、重鏈CDR3氨基酸序列為GWSYNGVDP。

4.如權(quán)利要求1所述的抗體，其特征在于，其重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)氨基酸序列分別選自以下各組中的一組：SEQ?ID?NO.13和SEQ?ID?NO.14所示的氨基酸序列、SEQID?NO.13和SEQ?ID?NO.15所示的氨基酸序列、SEQ?ID?NO.13和SEQ?ID?NO.16所示的氨基酸序列、SEQ?ID?NO.13和SEQ?ID?NO.17所示的氨基酸序列、SEQ?ID?NO.13和SEQID?NO.18所示的氨基酸序列、SEQ?ID?NO.13和SEQ?ID?NO.19所示的氨基酸序列、SEQID?NO.13和SEQ?ID?NO.20所示的氨基酸序列。

5.如權(quán)利要求1~4任一所述的抗體，其特征在于，其為單鏈抗體、Fab、微型抗體、嵌合抗體或全抗體免疫球蛋白IgG1、IgG2、IgG4、IgA、IgE、IgM或IgD。

6.編碼權(quán)利要求1~5任一項所述抗體的基因。

7.如權(quán)利要求6所述的基因，其特征在于，編碼重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)的核苷酸序列選自以下各組中的一組：SEQ?ID?No.21和22所示的核苷酸序列、SEQ?ID?No.21和SEQ?ID?No.23所示的核苷酸序列、SEQ?ID?No.21和SEQ?ID?No.24所示的核苷酸序列、SEQ?ID?No.21和SEQ?ID?No.25所示的核苷酸序列、SEQ?ID?No.21和SEQ?ID?No.26所示的核苷酸序列、SEQ?ID?No.21和SEQ?ID?No.27所示的核苷酸序列、SEQ?ID?No.21和SEQ?ID?No.28所示的核苷酸序列。

8.含有權(quán)利要求6或7所述基因的表達載體。

9.含有權(quán)利要求8所述表達載體的宿主菌、宿主細胞或表達盒。

10.含有權(quán)利要求1~5任一項所述抗體的藥物或檢測試劑。

11.權(quán)利要求1~5任一項所述抗體在制備以VEGF為靶標(biāo)的疾病治療藥物中的應(yīng)用。

12.制備權(quán)利要求1~5任一項所述抗體的方法，其特征在于，利用噬菌體展示抗體庫技術(shù)篩選抗VEGF特異性單鏈抗體，獲得抗體輕重鏈可變區(qū)基因，并將其克隆入全抗體表達載體，通過哺乳動物表達系統(tǒng)對其進行全抗體表達，獲得其全抗體蛋白。

13.如權(quán)利要求12所述的方法，其特征在于，所述的抗體輕重鏈可變區(qū)基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.39和SEQ?ID?NO.40所示。

14.一種免疫毒素，其特征在于，包含連接于細胞毒性劑的權(quán)利要求1~5任一所述的抗體。

15.如權(quán)利要求14所述的免疫毒素，其特征在于，連接方式為抗體被標(biāo)記、體外交聯(lián)或分子偶聯(lián)。

16.如權(quán)利要求14所述的免疫毒素，其特征在于，所述細胞毒性劑包括化學(xué)分子、放射性同位素、多肽或毒素對細胞具有殺傷或誘導(dǎo)細胞死亡特性的物質(zhì)。

17.一種雙特異性或多特異性分子，其特征在于，包含權(quán)利要求1～5任一項抗體或抗體的抗原結(jié)合部位。

18.一種抗體與其他蛋白或/和多肽的融合蛋白，其特征在于，包含權(quán)利要求1～5之任一項抗體和功能性蛋白或多肽分子的復(fù)合物。

19.如權(quán)利要求18所述的融合蛋白，其特征在于，將抗體基因與免疫毒素或細胞因子基因連接構(gòu)建重組表達載體，通過哺乳動物細胞或其他表達系統(tǒng)獲得重組融合蛋白分子。