[發明專利]一株粘液真桿菌及其應用

有效

• 申請號: 201210532248.3
• 申請日: 2012-12-11
• 公開（公告）號: CN103865822A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 楊東輝;劉樹林;朱紅云;李淼鑫
• 申請（專利權）人: 北京大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/00;C12P39/00;C12P7/22;C12R1/01
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

1.一株粘液真桿菌（Eubacterium?limosum）ZL-II，它在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCC?No.6847。

2.生產腸二醇的菌劑，其活性成分為權利要求1所述的粘液真桿菌（Eubacterium?limosum）ZL-II?CGMCC?No.6846、單形擬桿菌（Bacteroides?uniformis）Strain-I?CGMCCNo.4897和遲緩埃格特菌（Eggerthella?lenta）ZL-III?CGMCC?No.6847。

3.權利要求2所述的菌劑在生產腸二醇中的應用。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：所述應用中，以下述物質中的至少一種作為底物：開環異落葉松樹脂酚二葡萄糖苷、開環異落葉松樹脂酚、羅漢松脂酚、落葉松樹脂醇、松脂醇、松脂醇二葡萄糖苷、丁香樹脂酚、牛蒡苷元、7-羥基羅漢松脂酚、牛蒡子苷、芝麻脂素、亞麻籽、牛蒡子、海藻、油菜子、燕麥麩、黑麥麩、小麥麩、大麥麩和玉米麩。

5.活性成分為權利要求1所述粘液真桿菌（Eubacterium?limosum）ZL-II?CGMCCNo.6846的菌劑。

6.權利要求1所述的粘液真桿菌（Eubacterium?limosum）ZL-II?CGMCC?No.6846或權利要求5所述的菌劑在如下（a）或（b）中的應用：

（a）脫甲基；

（b）生產4,4′-二羥基腸二醇。

7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于：所述應用中作為底物的是開環異落葉松樹脂酚。

8.根據權利要求3、4、6和7中任一所述的應用，其特征在于：所述應用中，采用厭氧培養的方式進行培養，實現底物的轉化。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于：所述厭氧培養的溫度為25-40℃。

10.生產腸二醇的方法，依次包括如下步驟：

（1）將菌體含量均為5~9×10⁷cfu/mL的粘液真桿菌（Eubacterium?limosum）ZL-IICGMCC?No.6846、單形擬桿菌（Bacteroides?uniformis）Strain-I?CGMCC?No.4897和遲緩埃格特菌（Eggerthella?lenta）ZL-III?CGMCC?No.6847三株菌的菌液按照體積比1：1：1的比例混合，得到混合菌液；

（2）取步驟（1）中得到的混合菌液，按照體積比1：10的比例接種到厭氧液體培養基中，37℃厭氧培養24h，得到増菌液；

（3）取步驟（2）中的所述増菌液，按照體積比1：10的比例接種到發酵培養基中，同時向培養體系中加入如下（a1）-（a4）中任一底物，37℃厭氧培養3~10天，從培養液中獲得腸二醇：

（a1）終濃度為20~40mg/mL的亞麻籽粕；

（a2）終濃度為0.5mg/mL的開環異落葉松樹脂酚二葡萄糖苷；

（a3）終濃度為30mg/mL的底物A；所述底物A為如下中的至少一種：牛蒡子、海藻、油菜子、燕麥麩、黑麥麩、小麥麩、大麥麩和玉米麩；

（a4）終濃度為0.5g/mL的底物B；所述底物B為如下中的至少一種：開環異落葉松樹脂酚、羅漢松脂酚、落葉松樹脂醇、松脂醇、松脂醇二葡萄糖苷、丁香樹脂酚、牛蒡苷元、7-羥基羅漢松脂酚、牛蒡子苷、芝麻脂素。