[發(fā)明專利]兩性載體修飾的聚合物顆粒及在蛋白質(zhì)樣品預(yù)處理中應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210531884.4
• 申請(qǐng)日: 2012-12-11
• 公開（公告）號(hào): CN103864967A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張麗華;鄧楠;朱貴杰;梁振;楊開廣;張玉奎
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所
• 主分類號(hào): C08F20/14
• 分類號(hào): C08F20/14;C08F20/18;C08F8/32;G01N1/28
• 代理公司: 沈陽(yáng)科苑專利商標(biāo)代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳

1.兩性載體修飾的聚合物顆粒，其特征在于：顆粒為聚丙烯酸酯類聚合物顆粒，通過(guò)表面的功能基團(tuán)修飾兩性載體分子，修飾的兩性載體等電點(diǎn)在2-14之間，顆粒粒徑為3-8μm。

2.按照權(quán)利要求1所述的顆粒，其特征在于：顆粒孔徑為其并可用于蛋白質(zhì)樣品的預(yù)處理；

所述聚丙烯酸酯類聚合物為以丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、丙烯酸丙酯、丙烯酸丁酯其中一種或多種為單體的聚合物。

3.按照權(quán)利要求1或2所述的顆粒，其特征在于：顆粒表面含有氨基功能基團(tuán)，通過(guò)戊二醛活化后，將兩性載體分子修飾在顆粒表面，并對(duì)顆粒表面進(jìn)行封尾與還原。

4.按照權(quán)利要求3所述的顆粒，其制備過(guò)程包括以下具體步驟：

（1）聚合物顆粒活化：顆粒分別經(jīng)過(guò)有機(jī)溶劑和磷酸緩沖液洗滌后，采用質(zhì)量-體積百分比濃度為5%-15%的戊二醛活化3-9小時(shí)；

（2）步驟（1）活化的顆粒修飾兩性載體：將步驟（1）活化的聚合物顆粒采用磷酸緩沖液洗滌后，與兩性載體反應(yīng)12-24小時(shí)；

（3）步驟（2）之后對(duì)顆粒表面封尾和還原：與兩性載體反應(yīng)之后，分別使用質(zhì)量-體積百分比濃度為10-15%的甘氨酸和質(zhì)量-體積百分比濃度為5-10%的氰基硼氫化鈉溶液反應(yīng)6-9小時(shí)。

5.按照權(quán)利要求4所述的顆粒，其特征在于：所述兩性載體為一種脂肪族多胺基多羧基的混合物，由異構(gòu)物和同系物組成。

6.一種權(quán)利要求1所述修飾兩性載體的聚合物顆粒可用于蛋白質(zhì)樣品預(yù)處理。

7.按照權(quán)利要求6所述的用于血清或血漿樣品預(yù)處理，其特征在于：

（1）兩性載體修飾的聚合物顆粒與樣品孵育：將兩性載體修飾的聚合物顆粒采用磷酸緩沖液洗滌，與蛋白質(zhì)樣品在室溫條件下孵育1-4小時(shí)；

（2）孵育后，對(duì)顆粒上的蛋白質(zhì)進(jìn)行洗脫：離心顆粒，去除上清液；采用磷酸緩沖液洗滌顆粒，去除上清液后，分別采用氯化鈉溶液,甘氨酸溶液，乙腈溶液進(jìn)行洗滌，收集洗脫液。

8.按照權(quán)利要求6或7所述的用于血清或血漿樣品預(yù)處理，其特征在于：所述蛋白質(zhì)樣品為血清或血漿樣品。

9.按照權(quán)利要求7所述的用于血清或血漿樣品預(yù)處理，其特征在于：所述氯化鈉溶液的濃度為0.5-2M，甘氨酸溶液的濃度為50-300mM,pH為1-3.5，乙腈溶液中乙腈與水的體積比為0.2-0.3，pH=2-4。