[發明專利]微小RNA分子miR491-5p在胰腺癌的治療和/或診斷和/或預后中的用途

有效

• 申請號: 201210530716.3
• 申請日: 2012-12-10
• 公開（公告）號: CN103861121A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 劉力;郭蓉
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院基礎醫學研究所
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;C12Q1/68;A61P35/00
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，涉及基因治療和/或基因診斷領域；具體而言涉及微小RNA分子在制備用于治療胰腺癌的藥物中的用途以及微小RNA分子在制備用于診斷和/或預后胰腺癌的裝置中的用途；更具體地，涉及miR491-5p在制備用于治療胰腺癌的藥物中的用途以及miR491-5p在制備用于診斷和/或預后胰腺癌的裝置中的用途。

背景技術

微小RNA（microRNA或miRNA）是一種可主動參與到生理與病理過程的新型的基因調控因子。這種類型的RNA是一類長度約為21-25個核苷酸（nt）的非編碼小RNA，其功能是在轉錄后水平調控靶基因的表達（Bartel,D.P.，2004；Kim,V.N.等人，2009）。

雖然功能性miRNA的產生被定義為幾個不同的階段，如初始miRNA（pi-miRNA）,前體miRNA（pre-miRNA）及成熟miRNA等，但在細胞內這一過程其實是一個由胞質到胞核的連續加工過程。在細胞核內，轉錄產物首先形成一個具有頸環結構的初始pi-miRNA，隨后pi-miRNA經核蛋白DGCR8和胞核的雙鏈RNA核酸酶Drosha加工成約70nt的發卡型中間產物，是成熟前的miRNA，被稱作前體miRNA即pre-miRNA（Lee,Y.等人，2003；Han,J.等人，2004）。Pre-miRNA經過核孔上的外轉蛋白5（exportin?5）及GTP-Ran的共同作用被運送至胞漿（Lund,E.等人，2004；Bohnsack,M.T.等人，2004）。在胞漿，另一個雙鏈RNA核酸酶Dicer將pre-miRNA加工成21-25nt的成熟miRNA（Ketting,R.F.等人，2001；Hutvagner,G.等人，2001）。除Dicer外，所形成的RNA誘導的沉默復合物（RISC）還包括Ago蛋白家族成員，其作用是將成熟miRNA帶到靶基因mRNA（Maniataki,E.等人，2005；Gregory，R.I.等人，2005；Chendrimada,T.P.等人，2005）。

胰腺癌是一種沒有早期癥狀并在人群中致死率很高的侵襲性疾病（Jemal,A.等人，2010；Krejs,G.J.2010；Lowenfels,A.B.等人，2006）。正常胰腺主要有導管上皮細胞、胰島細胞及腺泡等構成，胰島中有70-80%的細胞是胰島β細胞。80%的胰腺癌是由導管上皮細胞誘發的。由于對胰腺癌生物標記物的篩選對疾病的早期診斷及預后均很重要，因此這方面工作近些年來受到了很大的關注（Wang,J.等人，2011）。用甲醛固定石蠟包埋的胰腺癌樣本以及手術切除的胰腺癌及其對照組織樣本，在miRNA芯片上進行大規模miRNA表達譜分析研究發現至少有40種miRNA被顯著上調或下調（Bloomston,M.等人，2007；Szafranska,A.E等人，2007；Jiao,L.R.等人，2012；Ali,S.等人，2012；Papaconstantinou,I.G.等人，2012）。某些有差異性表達的miRNA如miR-21、miR-155和miR-196a-2可能與腫瘤的增殖及預后差有關。

然而，這些大規模miRNA芯片篩查過程中未檢測出hsa-miR491-5p（簡稱miR491-5p）與胰腺癌發生的相關性。本發明人的研究顯示，miR49-5p在正常人胰腺組織中表達量很高，而在胰腺癌細胞中表達水平較低，因此具有潛在地抑制胰腺癌增殖的作用，有可能對胰腺癌的治療與診斷和/或預后產生積極影響。

發明內容

根據本發明的一方面，本發明提供了微小RNA分子miR491-5p在制備用于治療胰腺癌的藥物中的用途。

在一些具體的實施方式中，其中所述miR491-5p選自如下形式的一種或多種：miR491-5p的初始miRNA、miR491-5p的前體miRNA或成熟miR491-5p。

在優選的實施方式中，所述miR491-5p是成熟miR491-5p。

在一些具體的實施方式中，成熟miR491-5p是如SEQ?ID?NO：1所示的RNA。

在另一些具體的實施方式中，成熟miR491-5p加工自如SEQ?ID?NO：2所示的DNA的RNA。

如上所述的序列SEQ?ID?NO：1由23個核苷酸組成，其3′末端核苷酸序列可與靶基因5′末端形成約7個核苷酸完全匹配，形成種子序列（seed?sequence）。