[發明專利]一種螯合球菌及其制備和應用

有效

• 申請號: 201210529692.X
• 申請日: 2012-12-10
• 公開（公告）號: CN103865821A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 吳剛;董范;柯從玉;胡書寶;謝剛;游靖;孫嫵娟;余吉良;李青
• 申請（專利權）人: 中國石油天然氣股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;C09K8/582;C12R1/01
• 代理公司: 北京市中實友知識產權代理有限責任公司 11013
• 代理人: 謝小延

1.一種螯合球菌，其特征在于：螯合球菌（Chelatococcus?sp.）HB-4CGMCCNo.6458已經在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏時間為2012年08月17日。?

2.一種權利要求1所述的螯合球菌的應用，其特征在于：將菌株在45℃條件下采用12m³工業發酵罐發酵48小時，發酵后的菌液按照1%的質量濃度與質量1%的營養液從注水井與注水注入到油藏中，注入量為0.07PV。?

3.根據權利要求2所述的螯合球菌的應用，其特征在于：營養液為0.6%葡萄糖、0.1%蛋白胨、0.08%酵母膏、0.1%氯化銨、0.1%磷酸氫二納、0.02%磷酸二氫鉀，總質量濃度為1.0%。?

4.根據權利要求2所述的螯合球菌的應用，其特征在于：發酵用培養基為葡萄糖2%，蛋白胨0.05%，酵母粉0.05%，尿素0.05%，硫酸銨0.05%，磷酸二氫鉀0.5%，7水硫酸鎂0.02%，氯化鈉0.01%，自來水配制。?

5.一種權利要求1所述的株螯合球菌的制備方法，其特征在于：?

（1）采樣和富集：從寶力格油田產出液及費油坑中進行取樣，然后采用以富集培養基進行富集；?

富集培養基按質量百分比組成為：葡萄糖2%，蛋白胨0.05%，酵母粉0.05%，尿素0.05%，硫酸銨0.05%，磷酸二氫鉀0.5%，7水硫酸鎂0.02%，氯化鈉0.01%，自來水配制；?

制備富集培養基的工藝條件為：pH值6~8，115℃滅菌20分鐘；培養溫度為25-45℃，培養時間為8~48小時；?

（2）菌種的篩選和純化：?

將質量2%的混合菌液與質量5%的寶力格混合油加入到富集培養基中，45℃條件下在搖床恒溫培養48小時，觀察原油的乳化情況并測量發酵液的表界面張力值，對原油能夠完全分散乳化并且發酵液表/界面張力值降低大于50%以?上的樣品進行下一步的分離純化，分離用培養基：營養瓊脂+5%脫纖維羊血；對分離純化的單菌株重復步驟（2）的實驗，最終篩選出一株菌種，經16s?rDNA序列分析并結合生理生化實驗確定該菌株為螯合球菌屬。?