[發明專利]一種燕麥再生體系構建方法

無效

• 申請號: 201210529053.3
• 申請日: 2012-12-02
• 公開（公告）號: CN102972300A
• 公開（公告）日: 2013-03-20
• 發明（設計）人: 劉景輝;高彩婷;寶力高;趙寶平;李倩
• 申請（專利權）人: 內蒙古農業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于燕麥再生體系構建方法。

背景技術

植物再生體系的構建是利用植物細胞全能性，在無菌條件下利用人工培養基對植物組織的培養，是珍稀物種保留、繁殖的重要途徑，也是工廠化生產脫毒苗的基礎，更是基因功能驗證的必要環節。

燕麥現在的再生體系構建方法主要要有愈傷組織培養、根尖、花藥培養等。愈傷組織培養的主要外植體為未成熟胚與成熟胚。未成熟胚培養與成熟胚培養出愈率高，但其與花藥培養一樣存在時空性，必須等植物性細母胞成熟時或幼胚開始分化才可取材。而且禾本科植物根尖培養與花藥培養也要誘導產生愈傷組織，經愈傷組織分化后成苗。而來源于不同植物或同一種植物不同部位的愈傷組織，在顏色、結構、生長習性等都可能存在差異，因此需要根據不同的實驗目的控制愈傷組織的狀態。這對外植體、實驗條件如：溫度、光照、pH值、培養基的配制等的要求嚴格，每種培養體系的構建都需要摸索很長時間，耗費大量的人力、物力。且在愈傷組織培養過程中，因細胞的分裂旺盛極容易產生變易，而造成變易發生的因素很多，如：光照、溫度、藥品、紫外線等，這非常不利于基因功能的驗證，也不利于植物遺傳穩定性的保持。

發明內容

本發明以優化燕麥再生體系為目的；以保持遺傳穩定性為核心，從提高組織培養成苗率出發，解決上述現行培養方式的弊端，提供一種燕麥再生體系的構建方法。

為解決上述技術問題，本發明的技術方案是：一種燕麥再生體系構建方法，所述燕麥再生體系構建方法采用葉基段培養，不經過愈傷組織直接分化成苗，包括如下步驟：

S1、將成熟燕麥種子滅菌后，用MS基本培養基培養4-7天；

S2、當燕麥葉長至3-5cm時，取葉基段用MSB培養基培養至成苗。

優選的，所述葉基段培養是種子萌發后取其基段培養，直接分化，向下生根，向上長葉。

優選的，所述MSB培養基為MS與B5相結合，加上IAA與水解酪蛋白。

采用了上述技術方案，本發明的有益效果為：本發明因采用葉基段培養，不經過愈傷階段，不需要繼代培養，避免了愈傷組織培養過程中可能產生的基因突變；不需要監控愈傷組織的狀態，不必摸索繼代培養條件，減少了實驗環節，節省人力、物力，大幅度的降低生產成本，提高產出效益。經過實驗測試，本發明的再生體系方法成苗率達98％以上，與現行愈傷組織培養方法比較，節省時間3至6個月，每升培養基成本降低0.11到4.68元。

附圖說明

圖1為種子發芽的示意圖；

圖2為葉基段培養的示意圖；

圖3為分化成苗的示意圖；

具體實施方式

下面結合施例對本發明進一步說明。

本發明的實施條件：無菌條件，培養基室，溫度、光照、濕度可控的培養室，操凈工作臺。

本發明的實質是：葉基段不經過愈傷組織而是直接產生不定芽，萌發成苗。

一種燕麥再生體系構建方法，所述燕麥再生體系構建方法采用葉基段培養，不經過愈傷組織直接分化成苗，包括如下步驟：

S1、將成熟燕麥種子滅菌后，用MS基本培養基培養4-7天；

S2、當燕麥葉長至3-5cm時，取葉基段用MSB培養基培養至成苗。

葉基段培養是種子萌發后取其基段培養，直接分化，向下生根，向上長葉。

MSB培養基為MS與B5相結合，加上IAA與水解酪蛋白。

本發明不局限于上述具體的實施方式，本領域的普通技術人員從上述構思出發，不經過創造性的勞動，所作出的種種變換，均落在本發明的保護范圍之內。