[發(fā)明專利]一種藤黃色單胞菌及其制備和應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210528104.0
• 申請日: 2012-12-10
• 公開（公告）號: CN103865820A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發(fā)明（設計）人: 董范;柯從玉;朱慶忠;胡書寶;吳剛;宋社民;王保華;薄海江;吳應德
• 申請（專利權）人: 中國石油天然氣股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;C09K8/582;C12R1/01
• 代理公司: 北京市中實友知識產權代理有限責任公司 11013
• 代理人: 謝小延

技術領域

本發(fā)明涉及微生物采油領域，具體涉及一株藤黃色單胞菌及其制備和在采油工程中的應用。?

背景技術

微生物采油技術是通過將篩選的微生物同營養(yǎng)液一同注入油藏，或者注入激活劑激活油藏中的內源微生物，利用微生物在油藏中的有益活動及其代謝產物與油藏中液相和固相的互相作用，改善原油的流動性質，從而提高原油采收率的綜合性技術。微生物采油技術經過多年的發(fā)展，逐漸成為目前國內外發(fā)展迅速的一項提高原油采收率技術，也是21世紀一項高新生物技術。?

微生物采油機理主要有微生物自身對原油的降解及其代謝產物對原油的作用，微生物對原油的降解作用體現在微生物以石油為碳源，長鏈烷烴被微生物降解為短鏈烷烴，從而增加原油流動性；而代謝產物作用主要包括生物表面活性劑、有機酸、生物氣以及小分子的有機物，這些組分都能從一定程度上降低原油粘度，增加原油流動性，從而啟動提高采收率的作用。顯然，這里提高采收率作用效果的大小與微生物的種類和功能有很大關系。?

中低溫稠油油藏由于原油本身粘度大，而且油藏溫度較低，結果導致原油流動性非常差，常規(guī)注水開發(fā)效果不理想，通過篩選高效降粘菌種并用于低溫稠油油藏提高采收率研究具有重要意義。?

根據查閱國內外專利和文獻發(fā)現，目前篩選出用于微生物驅油的菌種有黃單胞桿菌、惡臭假單胞菌、銅綠假單胞菌、地衣芽孢桿菌、嗜熱脫氮芽孢桿菌、腸桿菌、短芽孢桿菌、蠟狀芽孢桿菌、裂烴棒桿菌、野兔棒桿菌、酵母嗜石油桿菌、枯草桿菌、熱帶假絲酵母、球擬酵母、粘滯沙雷氏菌、陰溝腸桿菌、魯疫鏈球菌、梭形芽孢桿菌、波茨坦短芽孢桿菌、不動桿菌、明串球菌。室內研究表明，這些菌株都具有一定降低的降低發(fā)酵液表面張力和油水界面張力，部分能夠降解原油，具有降低原油粘度的功能，但都有一定的局限性，比如對地層溫度，礦化度以及原油性質的?適應性等方面，而且很少有經過物模驅油實驗評價和現場應用效果分析。?

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的是：提供一株可有效降解高蠟及高膠質原油，降低原油粘度并提高原油采收率一種藤黃色單胞菌及其制備和應用。?

本發(fā)明的技術方案是：本發(fā)明所提供的藤黃色單胞菌（Luteimonas?sp.）HB-2CGMCC?No.6457已經在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，保藏時間為2012年08月17日。?

藤黃色單胞菌（Luteimonas?sp.）CGMCC?No.6457是從寶力格油井產出液中分離得到的，其菌落為淡黃色，圓形，表面光滑不透明，邊緣整齊，直徑為1.5mm。?

細胞呈桿狀，大小為0.5μm×1.0~2.0μm，單個或成對排列。革蘭氏陰性，不生孢，產生β-聚羥基丁酸鹽顆粒。具體生理生化實驗見表1。?

表1藤黃色單胞菌部分生理生化特征?

注：“+”表示生長或反應陽性，“-”表示不生長或反應陰性?

實驗證明，藤黃色單胞菌（Luteimonas?sp.）CGMCC?No.6457能有效降解原油并改善原油性質，作用后的原油粘度由2300mPa.S下降到700mPa.S，降黏率達到了69.6%，原油組分中輕質組分增加，重質組分減少，原油流動性等到明顯改善。該菌株能夠產生一定量的有機酸和生物表面活性劑，發(fā)酵液的表面張力降低58%，油水界面張力降低了92%，能夠使原油與水完全乳化，形成典型的水包油乳液。該菌株可廣泛應用于采油工程及石油運輸領域，特別是微生物強化水驅增油領域。?

藤黃色單胞菌（Luteimonas?sp.）CGMCC?No.6457的篩選，由下列步驟組成：?

（1）采樣和富集?

（2）篩選和純化?

（3）菌株驅油效果評價?

（4）現場驅油實驗?

具體工藝步驟及工藝條件是：?

步驟（1）采樣和富集：從寶力格油田產出液及費油坑中進行取樣，然后采用以富集培養(yǎng)基進行富集。?

富集培養(yǎng)基質量百分比組成為：葡萄糖2%，蛋白胨0.05%，酵母粉0.05%，尿素0.05%，硫酸銨0.05%，磷酸二氫鉀0.5%，7水硫酸鎂0.02%，氯化鈉0.01%，自來水配制。?

制備富集培養(yǎng)基的工藝條件為：pH值6~8，115℃滅菌20分鐘，培養(yǎng)溫度為25-45℃，培養(yǎng)時間為8-48小時。?

步驟（2）菌種的篩選和純化：?