[發明專利]一種米曲霉菌株及其液態發酵生產真菌α-淀粉酶的方法

有效

• 申請號: 201210524063.8
• 申請日: 2012-12-07
• 公開（公告）號: CN103103135A
• 公開（公告）日: 2013-05-15
• 發明（設計）人: 姜黎黎;張淼;李平順
• 申請（專利權）人: 沈陽科納提克生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N9/30;C12R1/69
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 馮瓊;李玉秋

1.一種米曲霉菌株MFA-AO-3，其拉丁文學名為Aspergillus?oryzae，保藏編號為CGMCC?No.6834。

2.一種液態發酵生產真菌α-淀粉酶的方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）預處理：將權利要求1所述米曲霉菌株接入種子培養基中，常規培養24-72小時后，將菌液分散均勻；

（2）生產發酵：將步驟（1）所得米曲霉菌液按0.5-5%接種量接入發酵培養基，于通風量以每分鐘料液體積：空氣體積計為1:（1.5～2），溶氧量為20～25%的條件下，以500-1000rpm的攪拌速率進行發酵培養，培養時間為150-230小時。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，以重量體積百分比計，所述發酵培養基的組成為：1～6%馬鈴薯淀粉、0.1～2%酵母粉、0.1～0.5%磷酸氫二鉀、0.1～0.5%七水合硫酸鎂，0.01～0.05%消泡劑，余量為水，pH為5.5-6.5。

4.如權利要求2所述的方法，其特征在于，以重量體積百分比計，所述發酵培養基的組成為：1～6%馬鈴薯淀粉、1～6%大豆粉、0.1～1%硫酸銨、0.1～0.5%磷酸氫二鉀、0.1～0.5%七水合硫酸鎂，0.01～0.05%消泡劑，余量為水，pH為5.5-6.5。

5.如權利要求3或4所述的方法，其特征在于，所述消泡劑為大豆油。

6.如權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟（1）所述預處理還包括將破碎后的米曲霉菌進行種子發酵的過程。

7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，所述種子發酵過程為：將破碎后的米曲霉菌按0.5-5%接種量接入種子培養基中，于通風量以每分鐘料液體積：空氣體積計為1:（1.5～2），溶氧量為20～25%的條件下，以100-1000rpm的攪拌速率進行種子發酵培養，培養時間為24-72小時。

8.如權利要求2或7所述的方法，其特征在于，以重量體積百分比計，所述種子培養基為1～6%馬鈴薯淀粉、0.1～2%酵母粉、0.1～0.5%磷酸氫二鉀、0.1～0.5%七水合硫酸鎂，余量為水，pH為5.5-6.5。

9.如權利要求2所述的方法，其特征在于，在步驟（2）所述生產發酵期間，通過流加堿溶液調節發酵液的pH值為5.5-7.5。

10.如權利要求9所述的方法，其特征在于，所述堿溶液為重量體積比為10-40%的氫氧化鈉水溶液。

11.如權利要求2所述的方法，其特征在于，在步驟（2）所述生產發酵期間，當發酵罐中淀粉含量小于10g/L時，開始流加馬鈴薯淀粉水溶液，至發酵結束。

12.如權利要求11所述的方法，其特征在于，所述馬鈴薯淀粉水溶液的重量體積百分濃度為20-50%，流加速度為10-40ml/h/L發酵液。