[發明專利]一種重組蛋白的制備方法有效
| 申請號： | 201210523964.5 | 申請日： | 2012-12-07 |
| 公開（公告）號： | CN103045612A | 公開（公告）日： | 2013-04-17 |
| 發明（設計）人： | 閆乃紅;蔡素萍;周曉敏;殷燕;王云;劉旭陽;皮耐諾·弗蘭克 | 申請（專利權）人： | 四川大學華西醫院 |
| 主分類號： | C12N15/29 | 分類號： | C12N15/29;C12N15/63;C12N1/21;C12P21/02;C07K14/375;A61K38/16;A61P31/22;A61P27/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峽;張娟 |
| 地址： | 610041 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 重組 蛋白 制備 方法 | ||
1.SEQ?ID?NO.1所示的核苷酸序列。
2.一種重組載體，其特征在于：它包括SEQ?ID?NO.1或所示的核苷酸序列。
3.根據權利要求2所述的重組載體，其特征在于：它是pET26b(+)重組載體。
4.一種重組菌，其特征在于：它包括權利要求2或者3所述的重組載體。
5.根據權利要求4所述的重組菌，其特征在于：它為重組大腸桿菌。
6.一種制備重組蛋白的方法，其特征在于：它包括如下步驟：
（1）取權利要求4或者5所述的重組菌，在大腸桿菌培養基中培養，誘導表達，得菌液，離心，得菌體；
（2）取步驟（1）所得菌體，超聲裂解，離心，得上清，分離純化，即得。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于：步驟（1）所述培養是在含有40~60mg/ml卡那霉素的LB液體培養基中振搖培養，培養溫度為37℃。
8.根據權利要求6所述的方法，其特征在于：步驟（1）所述誘導表達使用的誘導劑為IPTG，誘導劑的濃度為0.1~1mM，誘導溫度為16~37℃，誘導時間為6~18h。
9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于：所述誘導劑的濃度為1mM，誘導溫度為18℃，誘導時間為18h。
10.根據權利要求6所述的方法，其特征在于：步驟（2）所述分離純化采用Ni親和層析柱。
11.權利要求6~10任意一項所述方法制備的重組蛋白。
12.權利要求11所述重組蛋白在制備抗病毒藥物中的用途。
13.根據權利要求12所述的用途，其特征在于：所述抗病毒藥物為抗單純皰疹病毒的藥物。
14.根據權利要求13所述的用途，其特征在于：所述抗病毒藥物為治療單皰病毒性角膜炎的藥物。
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