[發明專利]微生物發酵技術制備白藜蘆醇提取液的方法

有效

• 申請號: 201210523150.1
• 申請日: 2012-12-09
• 公開（公告）號: CN103031347A
• 公開（公告）日: 2013-04-10
• 發明（設計）人: 余國軍;何兆奎;張仁平
• 申請（專利權）人: 湖北省三鑫生物科技有限公司
• 主分類號: C12P7/22
• 分類號: C12P7/22;C12R1/865
• 代理公司: 十堰博迪專利事務所 42110
• 代理人: 高良軍

技術領域

?本發明涉及用微生物發酵技術制備白藜蘆醇提取液的方法。

背景技術

目前很多企業在進行白藜蘆醇的提取工藝上，主要是利用了白藜蘆醇易溶于有機溶劑的特性，在對原料的處理主要采用以下三種方法：?

1、回流提取法：稱取一定重量的虎杖粉，以4倍量、3倍量、3倍量95%乙醇回流提取2h、2h、1h，合并提取液，得到前處理原料，即白藜蘆醇提取液；再經過濾，濾液減壓濃縮至浸膏，真空干燥，稱重，從而獲得前處理原料。????

2、超聲提取法：稱取一定重量的虎杖粉，用乙醇浸泡2h后，放入溫度為50℃的超聲波清洗器中提取3次，功率為60%?。第一次溶劑用量為4倍量，第二、三次分別用3倍量乙醇提取20?min。合并提取液，得到前處理原料，即白藜蘆醇提取液；再經過濾，濾液減壓濃縮至浸膏，真空干燥，稱重，從而獲得前處理原料。

3、固定床連續提取法：稱取一定重量的虎杖粉（50g），用適量的乙醇浸泡17h，然后裝入固定床連續提取裝置，以0.5ml／min?kg的流速進行固定床連續提取，收集提取液，得到前處理原料，即白藜蘆醇提取液；過濾，減壓濃縮至浸膏，真空干燥，稱重，從而獲得前處理原料。

結論：（1）經過檢測得出回流提取法的提取率為0.201%,超聲提取的提取率為0.423%,固定床連續提取法的提取率為0.513%。（2）?用以上三種方法都能獲得白藜蘆醇，但工藝流程復雜、操作周期長、藥材損耗大、成本費用高，在合成的過程中還伴隨副產品以及環境污染,并且提取率都不高。

發明內容

?為了提高利用虎杖提取白藜蘆醇的提取率，本發明提出微生物發酵技術制備白藜蘆醇提取液的方法。

?為了達到目的?本發明采用的技術方案如下：微生物發酵技術制備白藜蘆醇提取液的方法，具體步驟如下：

（1）.將虎杖進行粉碎，得到虎杖粉；

（2）.在虎杖粉中加入原料重量1～2倍的水、原料重量4.8‰的發酵粉、原料重量6.4‰的糖化酶、原料重量2.4‰的活性干酵母和原料重量2.4‰的尿素；

（3）.將以上物料充分拌勻，在常溫下發酵7-9天，便可得到白藜蘆醇提取液。

以上得到的白藜蘆醇提取液，再經過萃取，減壓濃縮、真空干燥，即可獲得白藜蘆醇。

有益效果：本發明通過微生物發酵技術的使用，使白藜蘆醇提取液的白藜蘆醇含量提高了10～20倍，最大效益的發揮了原料的經濟價值和（生理效能?）使用價值，有利于避免后續提取工序中乳化現象的發生，加快萃取進程，提高白藜蘆醇的萃取率。

具體實施方式

實施例1：

微生物發酵技術制備白藜蘆醇提取液的方法，具體步驟如下：

（1）.將虎杖進行粉碎，得到虎杖粉；虎杖粉的粒度達到200-800目；

（2）.在虎杖粉中加入原料重量1.5倍的水、原料重量4.8‰的發酵粉、原料重量6.4‰的糖化酶、原料重量2.4‰的活性干酵母和原料重量2.4‰的尿素；

（3）.將以上物料充分拌勻，在常溫下發酵8天，便可得到白藜蘆醇提取液。

實施例2：將白藜蘆醇提取液烘干，取樣1g,用50ml的甲醇定溶,超聲1h；取溶液1ml用30%的乙腈稀釋，再次定溶10ml；取1ml定溶好的溶液通過微孔濾膜過濾到離心管，分3次（每次約30ul）注入到注溫箱進行測試,得到以下（提取率）數據：第1次為5.37%，第2次為5.19%，第3次為5.35%。綜合以上數據可以看出，經過發酵處理后，虎杖中白藜蘆醇的平均提取率約為5.30%。結論：發酵技術的使用使原料中的白藜蘆醇含量提高了10～20倍，有效提高底物含量，最大效益的發揮了原料的經濟價值和（生理效能?）使用價值。