[發(fā)明專利]一種蒲公英中總黃酮的提取方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210521873.8
• 申請日: 2012-12-07
• 公開（公告）號: CN102988448A
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發(fā)明（設計）人: 張成如
• 申請（專利權(quán)）人: 山東大學
• 主分類號: A61K36/288
• 分類號: A61K36/288;A61P31/04;A61P39/06
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 張建成

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技術(shù)領域：

本發(fā)明涉及一種生物活性物質(zhì)的提取方法，具體的是涉及蒲公英中總黃酮的提取方法。

背景技術(shù)：

　??蒲公英，別名蒲公草、黃花地丁、婆婆丁屬菊科植物蒲公英屬的多種藥用蒲公英的統(tǒng)稱，是一種中草藥?！侗静菥V目》記載：“蒲公英主治婦人乳癰腫，水煮汁飲及封之立消。解食毒，散滯氣、清熱毒、化食毒、消惡腫、結(jié)核?！?005年版中國藥典蒲公英項目中表明蒲公英的功能為清熱解毒、消腫散結(jié)、利尿通淋，用于治療乳癰、目赤、咽痛、肺痛、腸痛等，很多研究表明蒲公英具有廣譜抗菌作用、抗胃損傷作用、保單護肝作用、抗腫瘤作用、抗內(nèi)毒素作用、免疫調(diào)節(jié)作用、抗氧化自由基作用。?

蒲公英中含有多種活性成分，如蒲公英甾醇，蒲公英苦素、黃酮類、咖啡酸、綠原酸和多糖等。其中，蒲公英總黃酮對擬青霉菌和枯草桿菌具有良好的抑菌作用，并具有重要的抗氧化作用，能有效清除超氧陰離子自由基。

目前蒲公英總黃酮的提取方法，已經(jīng)取得了很大進展，歸納起來常用的方法是將蒲公英的醇提取物或水提取物懸浮于水中，依次用不同的溶劑萃取，常用的溶劑有氯仿、乙酸乙酯和飽和正丁醇。利用這種方法制取蒲公英中的總黃酮存在的主要問題是：（1）產(chǎn)品成本高，（2）產(chǎn)品中的雜質(zhì)，特別是有害物質(zhì)的含量較高，其中重金屬含量超過5ppm，農(nóng)藥殘留量大于10ppb，超過規(guī)定限度，同時不可避免地殘留毒性溶劑正丁醇等。

中國專利號為CN?102133254的專利公開了一種蒲公英總黃酮的提取方法，該方法蒲公英粉碎后，經(jīng)20目篩，再與石油醚混合均勻，濾紙過濾后，同30-50%的乙醇溶液按照料液比1:20-30進行混合，搖勻后浸泡1小時，最后在溫度60-70℃、超聲頻率40KHz下提取20-35min得到總黃酮提取物。該專利進行了超聲波處理之后未經(jīng)后處理操作，所得產(chǎn)品純度不夠高，同時，采用超聲波處理可能會對提取物的結(jié)構(gòu)造成影響，并且未進行多次提取，導致提取效率偏低。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種低成本、低毒性、產(chǎn)品結(jié)構(gòu)破壞程度低的蒲公英中總黃酮的提取方法，其步驟如下：

a．蒲公英去花粉碎后，過50-70目篩，得到蒲公英粉末，

b．將體積份數(shù)為65%-80%的乙醇溶液和a中所得的蒲公英粉末按照體積質(zhì)量比為3-15L/g混合，加熱回流提取1-5小時，過濾，得濾液和濾渣，

c．將b中蒲公英粉末換成b中所得濾渣重復步驟b一次，完成對濾渣的二次提取，得二次提取的濾渣和濾液，

d．將b和c中所得濾液減壓濃縮至乙醇濃度為1%-3%，得蒲公英總黃酮流浸膏，

e.步驟d中得到的流浸膏可以進一步加入甘草粉末制顆粒，干燥，經(jīng)檢驗合格后整粒。按常規(guī)方法制成膠囊劑、顆粒劑、片劑、丸劑等，其中甘草粉末和流浸膏的質(zhì)量比為1:6-10，如此得到的膠囊劑、顆粒劑、片劑或丸劑中總黃酮含量不少于260mg/100g。

上述的步驟b和步驟c中的乙醇還可以含有體積分數(shù)2%-15%的有機酸或者無機酸，所述的有機酸為甲酸、乙酸、甲磺酸、檸檬酸、酒石酸、馬來酸、富馬酸、蘋果酸、乳酸中的至少一種，所述的無機酸為硫酸、鹽酸、磷酸、硝酸、氫溴酸、氫碘酸中的至少一種。

上述的步驟b和步驟c中的乙醇水溶液的體積分數(shù)優(yōu)選為70%，所述的含的酸性物質(zhì)優(yōu)選為8%的乙酸，此優(yōu)選方案是經(jīng)過大量實驗驗證而得的。

本方案的有益效果可根據(jù)對上述方案的敘述得知，由于在該方案中沒有溶劑萃取，從而降低了產(chǎn)品的成本，同時，采用低毒性的有機酸或者無機酸，特別是乙酸的采用，減少了有毒物質(zhì)的含量，而減壓濃縮的提取方法，相對于超聲提取等方法，能更好的保持黃酮等結(jié)構(gòu)不被破壞。

由此可見，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有突出的實質(zhì)性特點和顯著的進步，其實施的有益效果也是顯而易見的。

具體實施方式：

　　下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案進行詳細的說明。

實施例1：

凈選去花適當粉碎的干燥蒲公英，經(jīng)60目篩后，取2kg置于圓底燒瓶中，加入含有5%甲酸的65%的乙醇15L，加熱回流提取3小時，過濾，濾液保留；藥渣以5L上述含2%乙酸的65%的乙醇進行二次提取，回流1小時，過濾，合并兩次濾液。將濾液減壓濃縮得蒲公英流浸膏1.82kg，經(jīng)紫外分光光度計檢測有效成分蒲公英總黃酮含量為26.8%。