[發(fā)明專利]分析亮氨酸生產(chǎn)過程中的沉淀劑鄰二甲苯-4-磺酸的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210521017.2
• 申請日: 2012-12-07
• 公開（公告）號: CN103048399A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉勛
• 申請（專利權(quán)）人: 重慶工貿(mào)職業(yè)技術(shù)學(xué)院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及分析化學(xué)領(lǐng)域，特別涉及到用HPLC法分析亮氨酸生產(chǎn)過程中的沉淀劑鄰二甲苯-4-磺酸的方法。

背景技術(shù)：

在提取法生產(chǎn)亮氨酸的過程中，常采用鄰二甲苯-4-磺酸作為沉淀劑，從復(fù)雜的氨基酸混合溶液中選擇性地沉淀亮氨酸，所形成的亮氨酸-沉淀劑復(fù)合物還需要通過氨解脫除沉淀劑、脫色等一系列精制過程，最終得到亮氨酸成品。其工藝流程如圖1；而分析、監(jiān)控生產(chǎn)過程各環(huán)節(jié)的沉淀劑含量是保證生產(chǎn)正常運行和產(chǎn)品質(zhì)量的必要條件，主要包括：(1)沉淀液；(2)沉淀母液；(3)氨解母液；(4)脫色液。鄰二甲苯-4-磺酸是帶苯環(huán)的有機(jī)化合物，在266nm有較強(qiáng)的紫外吸收峰，可以采用紫外分光光度法進(jìn)行測定。但在上述樣品中都存在同樣具有紫外吸收的干擾物質(zhì)。因此，需要采用HPLC等分離手段預(yù)先實現(xiàn)了鄰二甲苯-4-磺酸和干擾物質(zhì)的分離后，才能完成鄰二甲苯-4-磺酸的測定。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的是提供分析亮氨酸生產(chǎn)過程中的沉淀劑鄰二甲苯-4-磺酸的方法，它采用HPLC法進(jìn)行分析，從而保證亮氨酸生產(chǎn)的正常和穩(wěn)定運行，實現(xiàn)對亮氨酸產(chǎn)品的質(zhì)量控制。

為了解決背景技術(shù)所存在的問題，本發(fā)明的分析方法為：1)取樣、制樣：取亮氨酸生產(chǎn)過程中的沉淀液、沉淀母液、氨解母液、脫色液，分別以適當(dāng)?shù)谋稊?shù)稀釋，使稀釋液中鄰二甲苯-4-磺酸的濃度在0.1-10mmol/L范圍內(nèi)，再將稀釋液通過微孔過濾器過濾，將濾液作為分析溶液；2)設(shè)置流動相流速為0.8-1.0mL/min，檢測波長為266nm，柱溫為室溫；3)采用六通進(jìn)樣閥將制成的分析溶液20uL注入液相色譜儀中，記錄色譜圖，進(jìn)行色譜分析。

本發(fā)明分析方法選用C18，4.6mm×150mm分離柱，以醋酸鈉緩沖液-有機(jī)相作為流動相，其中有機(jī)相為甲醇、乙腈，優(yōu)選乙腈，醋酸鈉緩沖液為醋酸與醋酸鈉混合配制的緩沖溶液，在流動相中有機(jī)相與醋酸鈉緩沖液的體積比為：10∶90-40∶60，優(yōu)選為：20∶80，醋酸鈉緩沖液中醋酸濃度為0.10-0.20mol/L，優(yōu)選為：0.15mol/L，醋酸鈉緩沖液的pH值為：4.5-6.8，優(yōu)選為：6.0。

本發(fā)明具有以下有益效果：

1、采用碳十八烷基反向鍵合相色譜柱(C18，4.6mm×150mm)，能夠有效地分離樣品中的鄰二甲苯-4-磺酸和各種干擾物質(zhì)，準(zhǔn)確測定樣品中的鄰二甲苯-4-磺酸濃度。

2、簡便、快速，能準(zhǔn)確地分析亮氨酸生產(chǎn)過程中提取的各種樣品的鄰二甲苯-4-磺酸濃度，確保對生產(chǎn)過程的監(jiān)控。

附圖說明：

圖1是現(xiàn)有技術(shù)的工藝流程圖；

圖2是本發(fā)明實施例選用沉淀液后的示意圖；

圖3是本發(fā)明實施例選用沉淀母液的示意圖；

圖4是本發(fā)明實施例選用氨解母液的示意圖；

圖5是本發(fā)明實施例選用脫色液的示意圖。

具體實施方式：

本具體實施方式采用以下分析方法為：1)取樣、制樣：取亮氨酸生產(chǎn)過程中的沉淀液、沉淀母液、氨解母液、脫色液，分別以適當(dāng)?shù)谋稊?shù)稀釋，使稀釋液中鄰二甲苯-4-磺酸的濃度在0.1-10mmol/L范圍內(nèi)，再將稀釋液通過微孔過濾器過濾，將濾液作為分析溶液；2)設(shè)置流動相流速為0.8-1.0mL/min，檢測波長為266nm，柱溫為室溫；3)采用六通進(jìn)樣閥將制成的分析溶液20uL注入液相色譜儀中，記錄色譜圖，進(jìn)行色譜分析。

本發(fā)明分析方法選用C18，4.6mm×150mm分離柱，以醋酸鈉緩沖液-有機(jī)相作為流動相，其中有機(jī)相乙腈，醋酸鈉緩沖液為醋酸與醋酸鈉混合配制的緩沖溶液，在流動相中有機(jī)相與醋酸鈉緩沖液的體積比為20∶80，醋酸鈉緩沖液中醋酸濃度為0.15mol/L，醋酸鈉緩沖液的pH值為6.0。

實施例1：

(1)儀器與試劑

高效液相色譜儀：LabTech高效液相色譜系統(tǒng)及色譜工作站；

色譜柱：C18，4.6mm×150mm；

流動相：取無水醋酸鈉8.2g，加水900mL溶解，滴加36％的醋酸至pH為6.5，再補(bǔ)加水至1000mL，此為醋酸鈉緩沖液，將乙腈與醋酸鈉緩沖液以20∶80(體積比)的比例混合，經(jīng)0.45um微孔濾膜過濾，并超聲波脫氣；

流速：1.0mL/min；

檢測波長：266nm；

柱溫：室溫；

進(jìn)樣體積：20uL。

(2)實驗步驟